Question

【题目】“通山慈口橘子”全市闻名，某果汁股份有限公司就是以橘子为原材料，主要生产浓缩果汁、果酒、果干、香精和果胶等产品。工厂利用橘子生产果汁、果酒和果醋的大致工艺流程如下图所示，请分析回答：

（1）用橘子加工成果汁的过程中，为了提高橘子的出汁率并使果汁变得澄清，在预处理时需要加入果胶酶，果胶酶可以将果胶分解成___________，同时为了使其得到充分利用，节约成本，需要控制好酶的用量，探究果胶酶的最适用量的基本思路是_____________。

（2）为了进行果酒的发酵生产，通常先分离纯化酵母菌，然后扩大培养、固定化酵母细胞，最后才接种、发酵。

①在分离纯化酵母菌时，需要进行无菌操作，其中对培养基通常采用___________法，若采用稀释涂布平板法进行接种和计数，该法计数的值_________（填“大于”或“小于”）显微镜直接计数的值，原因是__________________________________________。

②在使用液体培养基扩大培养的过程中，需要放在摇床上进行振荡，目的是_____________________。

③制备固定化酵母细胞多采用___________法固定化。

Answer 1

【答案】半乳糖醛酸 设置一系列不同果胶酶用量梯度的组别，分别处理等体积的橘子汁，一段时间后过滤并检测果汁的体积，果汁体积最大所对应的最少酶用量为最适酶用量 高压蒸汽灭菌 小于 当两个或多个细胞连在一起时，在平板上只能观察到一个肉眼可见的菌落；且只能计活菌数量，而显微镜直接计数法能计死菌和活菌 增大培养液的溶氧量，同时使菌体充分利用营养物质 包埋

【解析】

果胶会影响出汁率，还会使得果汁浑浊，果胶酶能分解果胶，瓦解植物细胞壁以及胞间层，使得榨取果汁更容易，而且使得果汁变得澄清。

微生物的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法。

（1）果胶酶可以将果胶分解成小分子半乳糖醛酸；“探究果胶酶的最适用量”自变量是果胶酶的用量，因变量可以是出汁率或果汁的澄清程度，所以实验设计思路：设置一系列不同果胶酶用量梯度的组别，分别处理等体积的橘子汁，一段时间后过滤并检测果汁的体积，果汁体积最大所对应的最少酶用量为最适酶用量

（2）①培养基的灭菌方法是高压蒸汽灭菌法；当两个或多个细胞连在一起时，在平板上只能观察到一个肉眼可见的菌落，且只能计活菌数量，而显微镜直接计数法能计死菌和活菌，所以稀释涂布平板法计数时，获得的值小于显微镜直接计数的值。

②液体培养基需要振荡的目的是增大培养液的溶氧量，同时使菌体充分利用营养物质。

③酵母细胞体积较大，不适于用物理吸附法和化学结合法固定，固定化细胞应采用包埋法固定。