Question

9．回答下列有关动物细胞培养的问题：
（1）在动物细胞培养过程中，当贴壁细胞分裂长年到细胞表面时，细胞会停止分裂增增殖，这种现象称为细胞的接触抑制．此时，瓶壁上形成的细胞层数是单层（或一层）．要使贴壁细胞从瓶壁上分离下来，需要用酶处理，可用的酶是胰蛋白酶．
（2）随首细胞传代次数的增多，绝大部分细胞分裂停止，进而出现衰老甚至死亡的现象；但极少数细胞可以连续增殖，其中有些细胞会因遗传物质发生改变面变成细胞，该种细胞的黏着性降低，细胞膜表面蛋白质减少（糖蛋白）的量．
（3）现用某种大分子染料，对细胞进行染色时，观察到死细胞被污色，而活细胞不染色，原因是由于活细胞的膜具有选择透过性，大分子染料不能进入活细胞内，故活细胞不能着色．
（4）检查某种毒物是否能改变细胞染色体的数目，最好选用中细胞分裂到期的细胞用显微镜进行观察．
（5）给患者移植经细胞培养形成的皮肤组织后，发生了排斥现象，这是因为机体把移植的皮肤组织当作抗原进行攻击．

Answer 1

分析 1、动物细胞培养的流程：取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养．
2、细胞贴壁和接触抑制：悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁．细胞数目不断增多，当贴壁细胞分裂生长到表面相互抑制时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制．
3、动物细胞培养需要满足以下条件：①无菌、无毒的环境；②营养；③温度和pH；④气体环境：95%空气+5%CO₂．

解答 解：（1）细胞的接触抑制：细胞表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖．由于接触抑制，动物细胞培养时，瓶壁上只能形成的单层细胞．可以用胰蛋白酶处理使贴壁的细胞从瓶壁上分离下来．
（2）随着细胞传代次数的增多，绝大部分细胞分裂停止，进而出现衰老甚至死亡现象，但极少数细胞可以连续增殖，其中有些细胞会因遗传物质发生改（3）由于活细胞的膜具有选择透过性，大分子染料不能进入活细胞内，所以用某种大分子染料，对细胞进行染色时，观察到死细胞被染色，而活细胞不能被染色．变而变成不死性细胞，该种细胞的细胞膜表面蛋白质（糖蛋白）减少，细胞的黏着性降低．
（4）有丝分裂中期，细胞中染色体形态固定、数目清晰，是观察染色体的最佳时期．所以检查某种毒物是否能改变细胞染色体的数目，最好选用细胞分裂到中期的细胞用显微镜进行观察．
（5）器官移植后发生排斥反应由于机体把移植的皮肤组织当作抗原进行攻击导致的．
故答案为：
（1）相互接触接触抑制单层（或一层）胰蛋白酶
（2）衰老甚至死亡    不死性    降低   减少
（3）由于活细胞的膜具有选择透过性，大分子染料不能进入活细胞内，故活细胞不能着色（或由于死细胞的膜丧失了选择透过性，大分子染料能够进入死细胞内而着色）
（4）中
（5）抗原

点评 本题综合考查动物细胞培养、细胞膜的特点、细胞有丝分裂不同时期的特征、细胞保持及免疫的相关知识，重点考查动物细胞培养的相关内容，要求考生识记动物细胞培养的过程、条件和应用等知识，能灵活的运用所学的知识解答问题．