[题目]我国一科研团队将小麦液泡膜Na+/K+逆向转运蛋白基因(TaNHX2基因)转移到水稻细胞内.获得了转基因耐盐水稻新品种.回答下列有关问题: (1)我们可以通过人工方法合成TaNHX2基因.如图1表示人工合成了两条若干个碱基的DNA单链.两条链通过18个碱基对形成部分双链DNA片段.再利用Klenow酶补平.获得双链DNA.从功能� 题目和参考答案——青夏教育精英家教网—

【题目】我国一科研团队将小麦液泡膜Na+/K+逆向转运蛋白基因（TaNHX2基因）转移到水稻细胞内，获得了转基因耐盐水稻新品种。回答下列有关问题：

（1）我们可以通过人工方法合成TaNHX2基因，如图1表示人工合成了两条若干个碱基的DNA单链，两条链通过18个碱基对形成部分双链DNA片段，再利用Klenow酶补平，获得双链DNA。从功能看，Klenow酶是一种__________酶，获取目的基因的方法还有______________、____________。

（2）图2是3种限制酶的识别与酶切位点示意图，构建基因表达载体的时候，经BamH I酶切割得到的目的基因可以与图3所示质粒被_______________酶切后的产物连接，理由是________________________。连接后的重组质粒___________________（填“能”、“不能”或“不一定能”）被BamH I切割。

（3）基因表达载体通过农杆菌转化作用，就可以使目的基因进入某植物根细胞，并将其_______________，使目的基因的遗传特性得以稳定维持和表达。若要使该细胞再生出转基因植株需要采用_______技术。

（4）小麦与水稻差异很大，但却通过基因重组后，水稻能够合成小麦的蛋白质，这是因为_______________。

【答案】DNA聚合从基因文库中获取 PCR技术扩增目的基因 Sau3 A I 和Sau3A I两种酶切割片段产生的黏性末端互补不一定插入到植物细胞的染色体DNA上植物组织培养小麦和水稻共同一套遗传密码

【解析】

基因工程技术的基本步骤：

（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。

（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。

（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。

（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。

（1）由图1可知，利用Klenow酶补平，获得双链DNA。由此可见，Klenow酶是一种DNA聚合酶，获取目的基因的方法还有从基因文库中获取、PCR技术扩增目的基因。

（2）由图2可知，BamH I酶和Sau3A I两种酶切割片段产生的黏性末端互补，故BamH I酶切割得到的目的基因可以与图3所示质粒被Sau3A I酶切后的产物连接。连接后的重组质粒可能形成不同的序列，所有不一定能再被BamH I切割。

（3）基因表达载体通过农杆菌转化作用，就可以使目的基因进入某植物根细胞，并将其插入到植物细胞的染色体DNA上，使目的基因的遗传特性得以稳定维持和表达。若要使该细胞再生出转基因植株需要采用植物组织培养技术。

（4）小麦与水稻差异很大，但小麦和水稻共同一套遗传密码，故通过基因重组后，水稻能够合成小麦的蛋白质。

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品种

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100

光饱和点（Klx）

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1200

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