Question

【题目】通过基因工程将抗生素基因转入植物体内，可以增强其抗病菌的能力。据此回答下列问题。

（1）抗生素能选择性地作用于细菌体细胞DNA、RNA和_______合成系统的特定环节，干扰细胞的代谢作用，妨碍生命活动或使其停止生长，甚至死亡。抗生素发挥作用的主要场所是___________。

（2）基因工程中常需要使用DNA连接酶，既能连接黏性末端，又能连接平末端的DNA连接酶是__________________。

（3）若要使目的基因在受体细胞中表达，需要构建基因表达载体，包含目的基因、________、启动子、_________、复制原点。

（4）将目的基因导入植物体细胞通常用__________________，原理是利用其菌体中质粒的T-DNA片段可_____________的特点。

（5）要确认抗生素禁言是否在转基因植株中正确表达，应检测转基因植株中该基因的______是否呈阳性。

Answer 1

【答案】蛋白质 细胞质基质和核糖体( 蛋白质) T4 DNA连接酶 标记基因 终止子 农杆菌转化法 转移并整合到染色体DNA上 表达产物

【解析】

基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。

（1）抗生素能选择性地作用于细菌体细胞DNA、RNA和蛋白质合成系统的特定环节，干扰细胞的代谢作用，妨碍生命活动或使其停止生长，甚至死亡。抗生素发挥作用的主要场所是细胞质基质和核糖体。

（2）基因工程中常需要使用DNA连接酶，既能连接黏性末端，又能连接平末端的DNA连接酶是T-DNA连接酶。

（3）基因表达载体需要包含的结构有目的基因、标记基因、启动子、终止子、复制原点。

（4）将目的基因导入植物体细胞通常用农杆菌转化法，原理是利用其菌体中质粒的T-DNA片段可转移并整合到染色体DNA上的特点。

（5）要确认抗生素基因是否在转基因植株中正确表达，应用抗原-抗体杂交的方法检测转基因植株中该基因的表达产物是否呈阳性。