Question

16．如图为利用人成纤维细胞（具分裂能力、能在HAT培养基上存活）和小鼠骨髓瘤细胞（具分裂能力、不能在HAT培养基上存活）进行人类基因定位的操作示意图，请回答相关问题．

（1）操作所用的成纤维细胞应传代10代以内，诱导融合时需要加入的促融剂是PEG．
（2）人、鼠细胞先经过细胞膜融合形成多核或双核细胞，再经过一次有丝分裂，形成单核细胞．HAT培养基起选择培养作用，操作中加入乌本苷的目的是选出杂交瘤细胞．

Answer 1

分析 分析题图：图示表示骨髓瘤细胞与成纤维细胞的融合过程，该技术的基础是动物细胞培养技术．原生质体融合指通过人为的方法，使遗传性状不同的两个细胞的原生质体进行融合，借以获得兼有双亲遗传性状的稳定重组子的过程．据此解答．

解答 解：（1）操作所用的成纤维细胞应在10代以内，10代以内的细胞能保持正常的二倍体核型；可以采用物理（离心、振动）、化学（PEG）、生物诱导（灭活的病毒）融合方法．
（2）人、鼠细胞先经过细胞膜融合形成多核细胞，经过一次有丝分裂，形成单核细胞．据题干信息，人成纤维细胞能在HAT培养基上存活，而小鼠骨髓瘤细胞不能在HAT培养基上存活，则HAT培养基起选择培养作用，筛选出人成纤维细胞和成纤维细胞融合的杂交细胞，操作中加人鸟本苷的目的是除去成纤维细胞，筛选出杂交细胞．
故答案为：
（1）10    PEG
（2）多核或双核        有丝分裂      选择      选出杂交瘤细胞

点评 本题结合图解，考查动物细胞融合、动物细胞培养和培养基对微生物的选择作用，要求考生识记动物细胞融合的概念及用途；识记动物细胞培养的条件；掌握培养基的种类及作用，能结合题中和图中信息准确答题．