Question

【题目】降钙素是一种多肽类激素，某科学机构为了研究一种新型降钙素，从预期新型降钙素的功能出发，推测相应的脱氧核苷酸序列，并人工合成了两条DNA单链，两条链形成部分双链DNA片段，再利用Klenow酶补平，获得双链DNA，过程如图．在此过程中发现，合成较长的核苷酸单链易产生缺失碱基的现象．分析回答下列问题：
（1）上述制备新型降钙素，运用的现代生物工程技术是 ． Klenow酶是一种酶．两条DNA单链能合成部分双链DNA的原因是 ．
（2）获得的双链DNA经限制酶切后插入到大肠杆菌质粒中，筛选含重组质粒的大肠杆菌并进行DNA测序验证． ①要进行重组质粒的鉴定和选择，需要大肠杆菌质粒中含有 ．
②导入大肠杆菌时，要用处理．
③经DNA测序表明，最初获得的多个重组质粒，均未发现完全正确的基因序列，最可能的原因是 ．

Answer 1

【答案】
（1）蛋白质工程； DNA聚合酶；两条DNA单链中存在互补配对的碱基
（2）标记基因； Ca2+；合成的DNA单链较长,碱基发生了缺失
【解析】解：（1）根据材料中“从预期新型降钙素的功能出发，推测相应的脱氧核苷酸序列，获得双链DNA”，可以确定运用的现代生物工程技术是蛋白质工程．由图可知Klenow酶能够将单链DNA延伸，可见它是一种DNA聚合酶．由于两条DNA单链中存在互补配对的碱基，因此两条DNA单链能合成部分双链DNA．（2）①基因工程中，重组质粒的鉴定和选择依靠标记基因．

②大肠杆菌为微生物，作为基因工程的受体细胞，需要用Ca2+处理大肠杆菌，使其处于感受态．

③如上图，在合成DNA双链时，如果合成的核苷酸单链较长，容易发生缺失碱基的现象．会引起最初获得的多个重组质粒，均未发现完全正确的基因序列的可能．

所以答案是：（1）蛋白质工程 DNA聚合酶 两条DNA单链中存在互补配对的碱基（2）标记基因 Ca2+ 合成的DNA单链较长，碱基发生了缺失

【考点精析】掌握基因工程的原理及技术和蛋白质工程是解答本题的根本，需要知道基因工程的原理是利用DNA重组技术；蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求．