Question

19．抗虫稻是一种被导入了bt毒蛋白的转基因稻，图是获取目的基因的流程：

回答下列问题
（1）图中基因组文库大于（小于/等于/大于）cDNA文库，B过程需要的酶是逆转录酶；A、C过程中可以（可以/不可以）使用同一种探针筛选含目的基因的菌株．
（2）构建基因表达载体时用限制酶切割DNA后可能产生黏性末端，也可能产生平末端，后者需用T₄（E•coil/T₄） DNA连接酶通过催化磷酸二酯键使目的基因与质粒连接起来，为了检测目的基因是否成功翻译，可能需要用带标记的目的基因做探针来检测是否转录出mRNA．
（3）抗虫水稻的培育还需要借助植物组织培养技术才能得到完整植株，培育过程中的受体细胞可以选用愈伤组织细胞，与采用叶肉细胞相比较，其优点是全能性高（分裂能力强，全能性高）．
（4）上述基因工程中的核心步骤是基因表达载体的构建，其目的是使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代，同时使目的基因能够表达和发挥作用．
（5）稻蟹种养是根据稻养蟹、蟹养稻、稻蟹共生的理论，在稻蟹种养的环境内，蟹能清除田中的杂草，吃掉害虫，排泄物可以肥田，促进水稻生长；而水稻又为河蟹的生长提供丰富的天然饵料和良好的栖息条件，互惠互利，形成良性的生态循环．生态工程所遵循的基本原理有整体性、协调与平衡、物质循环再生和物种多样性等原理．

Answer 1

分析 分析题图：A表示从基因组文库中筛选含有目的基因的菌株；B表示逆转录过程，需要逆转录酶；C表示从部分基因文库中筛选获得含有目的基因的菌株．基因组文库是指将某生物的全部基因组DNA切割成一定长度的DNA片段克隆到某种载体上形成的信使，而cDNA文库是由mRNA经逆转录形成的基因组成的，由于基因的选择性表达，所以cDNA文库小于基因组文库．

解答 解：（1）基因组文库包含某种生物所有的基因，而cDNA文库是由mRNA经逆转录形成的基因组成的，由于基因的选择性表达，cDNA文库只包含某种生物部分基因，所以cDNA文库小于基因组文库．B过程是以RNA为模板生成DNA的过程，是逆转录过程，需要逆转录酶催化．A和C过程可以用同一种探针筛选含目的基因的菌株．
（2）T₄DNA连接酶能连接平末端的磷酸二酯键，使目的基因与质粒连接起来．检测目的基因是否转录形成mRNA，可通过分子杂交技术进行检测．这种技术需要用带标记的目的基因做探针．检测目的基因是否成功翻译，可以用抗原-抗体杂交技术．
（3）愈伤组织是经脱分化而来，其全能性要高于体细胞；该过程表示将单个体细胞培育成完整植株个体，其方法是植物组织培养．
（4）基因工程中的核心步骤是基因表达载体的构建，其目的是使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代，同时使目的基因能够表达和发挥作用．
（5）分解者可以将动物粪便分解成无机物，供水稻利用；增加生物种类可以使生态系统的营养结构变得复杂，加快生态系统的物质循环和能量流动．
故答案为：
（1）大于   逆转录酶    可以
（2）T₄     磷酸二酯   带标记的目的基因
（3）植物组织培养        全能性高（分裂能力强，全能性高）
（4）基因表达载体的构建    受体细胞
（5）物质循环再生         物种多样性

点评 本题考查基因操作的基本过程弄清cDNA文库和基因组文库的差别、基因表达载体的构成、目的基因获取途径和导入受体细胞的方法是正确解答该题的前提．