Question

【题目】通过设计引物，PCR技术可以实现目的基因的定点诱变。图引物1序列中含有一个碱基T不影响引物与模板链的整体配对，反应体系中引物1和引物2的5’端分别设计增加限制酶a和限制酶b的识别位点。有关叙述正确的是（ ）

A. 引物中设计相同的限制酶识别位点有利于目的基因定向插入

B. 在PCR反应体系中还需加入核苷酸、解旋酶、Taq酶等

C. 第3轮PCR，引物1能与图中②链的3’端结合，形成两条链等长的突变基因

D. 第3轮PCR结束后，含突变碱基对且两条链等长的DNA占1/2

Answer 1

【答案】C

【解析】

PCR又称多聚酶链式反应，该反应需要在一定的缓冲溶液中才能进行，如提供：DNA模板、分别与两条模板链结合的两种引物、四种脱氧核苷酸、耐热的DNA聚合酶、同时通过控制温度使DNA复制在体外反复进行。

引物1和引物2的5’端分别设计增加限制酶a和限制酶b的识别位点，有利于目的基因的定向插入，A错误；在PCR反应体系中还需加入脱氧核苷酸、Taq酶等，不需要加入解旋酶，PCR中利用热变性打开DNA双链，B错误；通过2轮复制后，可以获得以①链为模板合成的②链，经过第三轮复制，以②链为模板，引物1能与图中②链的3’端结合，形成两条链等长的突变基因，C正确；第3轮PCR结束后，含突变碱基对且两条链等长的DNA只有一个，即以②链为模板合成的DNA分子，总DNA数目是23=8个，故含突变碱基对且两条链等长的DNA占1/8，D错误。因此，本题答案选C。