[题目]石油烃是石油管道泄漏的主要污染物.为了筛选出分解石油烃能力较强的微生物.进行了如下系列操作.请回答问题:(1)分解石油烃的微生物一般从土壤中分离.获取土壤样品的取样地点最好选在 .(2)图1表示获取土壤样品后的研究过程.为了能有效地分离出分解石油烃的微生物.①③号瓶所用的液体培养基的成分共有的特点是 .从而有利于分解石油烃的微生物的生长.(3)可� 题目和参考答案——青夏教育精英家教网—

【题目】石油烃是石油管道泄漏的主要污染物。为了筛选出分解石油烃能力较强的微生物，进行了如下系列操作。请回答问题：

（1）分解石油烃的微生物一般从土壤中分离，获取土壤样品的取样地点最好选在_____________。

（2）图1表示获取土壤样品后的研究过程。

为了能有效地分离出分解石油烃的微生物，①③号瓶所用的液体培养基的成分共有的特点是________，从而有利于分解石油烃的微生物的生长。

（3）可采用图2中平板乙所示的____________(方法）检测图1的③号瓶中分解石油烃的微生物数量。在接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养一段时间，这样做的目的是_____________；然后，将图1③号瓶中的1mL菌液稀释100倍，在3个平板上用该方法分别接入0.1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37。据此可得出每毫升该菌液中的活菌数为______________个。

（4）Ⅰ.若实验室采用图3中的操作分离纯化优良菌种，首次接种最合理的排序是_________。

Ⅱ.下列有关操作正确的是______________（填字母）。

A.划线分离时，需要把接种环深入到培养基中进行接种

B.划线时要将最后一区域的划线与第一区域的划线相连

C.超净工作台在使用前，可用紫外线灯杀菌

【答案】被石油污染处以石油烃为唯一碳源稀释涂布平板法检测培养基灭菌是否合格 3.8×104 ②①④①③② C

【解析】试题分析：本题的知识点是微生物培养过程中的无菌技术，分离微生物的常用的接种方法和接种操作过程，主要考查学生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。为筛选某种特定的微生物，常用选择培养基对微生物进行初步筛选，要筛选能分解石油的的微生物，就应该以石油为唯一碳源。不能分解石油的微生物由于无法获得碳源而死亡。在微生物的纯化培养过程中需要接种，接种最常用的方法是平板划线法和稀释涂布平板法。接种的目的是使聚集在一起的微生物分散成单个细胞，并在培养基表面形成单个细菌繁殖而成的子细胞群体--菌落。

（1）要获取相应的菌种，应到相应的环境中获取，获取土壤样品的取样地点最好选在被石油污染明显处。

（2）为了能有效地分离出分解石油烃的微生物，过程①一④所用培养基，其成分的特点是以石油烃为唯一碳源，从而有利于目的菌的生长，抑制其他微生物的生长。

（3）据图乙可以看出，图乙平板的菌落基本呈均匀分布，所用操作方法为稀释涂布平板法。在接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养一段时间，这样做的目的是检测培养基灭菌是否合格，3个平板上的平均菌落数分别为（39+38+37）/3=38个，因此每毫升该菌液中的活菌数为（C/V）×M=（38/0.1）×100=3.8×104个。

（4）I．平板划线的操作的基本步骤是：右手持接种环，经火焰灭菌，即图中的②；待凉后，在火焰旁打开盛有菌液的试管棉塞，并将试管口过火焰，即图中的①；将以冷却的接种环伸入菌液，沾取一环菌液，即图中的④；将试管口过火焰并塞上棉塞，即图中的①；左手斜持琼脂平板，并将皿盖打开一条缝，右手于火焰近处將接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线，盖上皿盖，接种环不应划破培养基表面，即图中的③；烧灼接种环，杀灭环上残留菌液，即图中的②；待冷却后从第一区域划线的末端开始往第二区内划线，重复以上操作，在第三四五区内划线，注意不要将最后一区的划线与第一区相连。故正确的顺序是②①④①③②。

II．划线分离时，不能把接种环深入到培养基中进行接种，只能在培养基表面进行划线操作，A错误；划线时最后一区的划线不能与第一区的划线相连，B错误；超净工作台在使用前，可用紫外线灯照射30分钟，以杀死物体表面或空气中的微生物，C正确。

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