Question

5．MseⅠ、PstⅠ、EcoRⅠ三种限制酶的识别序列及切割位点分别是：GAAT^↓TAATTC，CTGCA^↓G，G^↓AATTC，如图1、图2中箭头表示相关限制酶的酶切点．若要用如图质粒和外源DNA构建重组质粒，需要使用的酶是（　　）

• A． 限制酶PstⅠ、DNA连接酶
• B． 限制酶EcoRⅠ、DNA连接酶
• C． 限制酶PstⅠ、DNA聚合酶
• D． 限制酶MseⅠ、DNA连接酶

Answer 1

分析 根据题意和图示分析可知：含目的基因的外源DNA含有限制酶PstⅠ、MseⅠ、EcoRⅠ的切割位点，其中EcoRⅠ酶的切割位点位于目的基因中；质粒含有限制酶PstⅠ和EcoRⅠ的切割位点．

解答 解：根据分析，要用如图质粒和外源DNA构建重组质粒，只可以用限制酶PstⅠ和DNA连接酶，不可以用MseⅠ和EcoRⅠ两种限制酶．
故选：A．

点评 本题结合图形，考查基因工程的原理和技术、酶的特性，要求考生识记基因工程的工具酶及作用，掌握基因工程的操作步骤，能根据图1和图2中信息选择合理的限制酶，能准确判断不同限制酶识别的切割位点，再结合所学的知识答题．