Question

6．水质细菌学检验是培水和污水水质分析工作中的一项重要指标．作为水质日常检测的七项指标（色度、浊度、细菌总数、大肠菌群、余氯、铁、锰）之一的细菌总数和大肠杆菌指数，能非常直观地反映水费细菌污染的程度．例如，我国饮用水标准规定，每升饮用水中大肠杆菌不超过3个．某学校生物兴趣小组欲通过实验来检测自来水中大肠杆菌的含量，已知大肠杆菌在伊红-美蓝培养基培养时，菌落呈深紫色．请根据下列有关实验步骤回答问题：
（1）配制培养基：配置伊红-美蓝培养基时，除水、无机盐、蛋白胨、乳糖、伊红、美蓝等基本原料外，还需要加入琼脂作为凝固剂．从功能上讲，这种培养基属于鉴别培养基．
（2）倒平板：配置好的培养基用高压蒸汽灭菌法灭菌后，待培养基冷却到50℃左右倒平板．平板冷凝后应将平板倒置放置，以防止皿盖上的水珠落入培养基．在接种之前，要随机选取若干灭菌后的空平板先行培养一段时间，这样做的目的是检测培养基平板灭菌是否合格．

（3）接种：该小组采用平板划线法分离自来水中的细菌，操作时，接种环通过灼烧灭菌，在第二次及以后划线时，总是从上一次的末端开始划线．这样做的目的是将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落．培养一段时间后，能正确表示该小组得到的结果为上图中的A．

Answer 1

分析 1、培养基按功能分：

种类	制备方法	特征	用途
选择培养基	培养基中加入某种化学成分	根据某种微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计的培养基使混合菌样中的劣势菌变成优势菌，从而提高该菌的筛选率	加入青霉素分离得到酵母菌和霉菌
鉴别培养基	加入某种试剂或化学药品	依据微生物产生的某种代谢产物与培养基中特定试剂或化学药品反应，产生明显的特征变化而设计	鉴别和区分菌落相似的微生物伊红和美蓝培养基可以鉴别大肠杆菌

2、微生物常见的接种的方法
①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养．在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落．
②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落．
3、无菌技术：消毒和灭菌

	消毒	灭菌
概念	使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物（不包芽孢和孢子）	使用强烈的理化因素杀死物体内外所用的微生物（包括芽孢和孢子）
常用方法	煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学药剂消毒法、紫外线消毒法	灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌
适用对象	操作空间、某些液体、双手等	接种环、接种针、玻璃器皿、培养基等

解答 解：（1）配置培养基时，凝固剂是琼脂；该培养基中含有伊红、美蓝，可以鉴别大肠杆菌，因此属于鉴别培养基．
（2）培养基采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌；平板冷凝后应将平板倒置放置，以防止皿盖上的水珠落入培养基；在接种之前，要随机选取若干灭菌后的空平板先行培养一段时间，这样做的目的是检测培养基平板灭菌是否合格．
（3）接种环应该采用灼烧灭菌法进行灭菌；采用平板划线法分离自来水中的细菌时，在第二次及以后划线时，总是从上一次的末端开始划线，这样可将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落．图中A采用的是平板划线法，B采用的是稀释涂布平板法．
故答案为：
（1）琼脂    鉴别培养基
（2）高压蒸汽灭菌    倒置      检测培养基平板灭菌是否合格
（3）灼烧     将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落     A

点评 本题考查微生物的分离和培养，要求考生识记培养基的组成成分、种类及功能；识记无菌技术及实例；识记接种微生物常用的两种方法及相关细节，能结合所学的知识准确答题．