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10.科学家通过基因工程培育抗虫棉时,需要从苏云金芽孢杆菌中提取出抗虫基因,“放入”棉花的细胞中与棉花的DNA结合起来并发挥作用,请回答下列有关问题:
(1)从苏云金芽孢杆菌中切割抗虫基因所用的工具是限制性内切酶,此工具主要存在于微生物中,其特点是一种限制性内切酶只能识别一种特定的核苷酸系列,并在特定的点位切割.
(2)基因表达载体的组成除了有目的基因外,还必须有复制原点、启动子、终止子和标记基因.
(3)进行基因操作一般要经过的四个步骤是:获取目的基因,构建基因表达载体,将目的基因导入受体细胞,目的基因的检测与鉴定.

分析 基因工程技术的基本步骤:
(1)目的基因的获取:方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成.
(2)基因表达载体的构建:是基因工程的核心步骤,基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等.
(3)将目的基因导入受体细胞:根据受体细胞不同,导入的方法也不一样.将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法;将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法;将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法.
(4)目的基因的检测与鉴定:分子水平上的检测:①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术;②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术;③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术.个体水平上的鉴定:抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等.

解答 解:(1)从供体细胞中获取目的基因需要利用限制酶.限制酶主要从原核生物中分离纯化出来,能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂,形成黏性末端或平末端.
(2)基因表达载体的组成除了有目的基因外,还必须有复制原点、启动子、终止子、标记基因.
(3)进行基因工程操作一般要经过的四个步骤是:目的基因的获取;基因表达载体的构建(或目的基因与运载体结合);将目的基因导入受体细胞;目的基因的检测与鉴定.
故答案为:
(1)限制性内切酶    微生物  一种限制性内切酶只能识别一种特定的核苷酸系列,并在特定的点位切割.
(2)终止子   标记基因
(3)获取目的基因 构建基因表达载体  将目的基因导入受体细胞  目的基因的检测与鉴定

点评 本题考查基因工程的原理及技术,要求考生识记基因工程的原理,掌握基因工程的具体操作步骤及各步骤中需要注意的细节,能结合所学的知识准确答题,属于考纲识记和理解层次的考查.

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