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    5．北美有一种常见的单基因遗传病称为α1-抗胰蛋白酶缺乏症，患者成年后会出现肺气肿及其他疾病，严重者甚至死亡．利用基因工程技术将控制该酶合成的基因导入羊的受精卵，最终培育出能在乳腺细胞表达人α1-抗胰蛋白酶的转基因羊，从而更容易获得这种酶．

    下列对于该过程的相关叙述错误的是（　　）
    A．目的基因与载体重组过程需要DNA连接酶的催化作用
    B．将目的基因导入羊的膀胱细胞中，将会更加容易得到α1-抗胰蛋白酶
    C．培养出的转基因羊的所有细胞中都含有该目的基因，故该羊有性生殖产生的后代也都能产生α1-抗胰蛋白酶
    D．载体上绿色荧光蛋白基因（GFP）的作用是便于筛选含有目的基因的受体细胞

    分析 基因工程技术的基本步骤：
    1、目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．
    2、基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．
    3、将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．
    4、目的基因的检测与鉴定：
    （1）分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．
    （2）个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．

    解答 解：A、目的基因与运载体需要DNA连接酶的催化构建形成重组质粒，A正确；
    B、将目的基因导入羊膀胱细胞中，可以从尿液中提取到α1抗胰蛋白酶，膀胱反应器没有时间和性别的限制，B正确；
    C、目的基因在受体细胞中不是成对的，只有一个，相当于杂合子Aa（A为目的基因），因此有性生殖产生的后代有$\frac{1}{4}$的可能不含目的基因，则也就不能产生α1抗胰蛋白酶，C错误；
    D、载体上绿色荧光蛋白基因（GFP）为标记基因，便于筛选含有目的基因的受体细胞，D正确．
    故选：C．

    点评 本题考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理、使用的工具及操作步骤，掌握各步骤中应注意的细节，再结合所学的知识准确答题，属于考纲识记层次的考查．

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