图1表示含有目的基因D的DNA片段长度和部分碱基序列.图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列.现有MspⅠ.BamHⅠ.MboⅠ.SmaⅠ4种限制性核酸内切酶切割的碱基序列和酶切位点分别为C↓CGG.G↓GATCC.↓GATC.CCC↓GGG.请回答下列问题:(1)图1的一条脱氧核苷酸链中.相邻两个脱氧核苷酸之间由键连接.(2)若用限制酶SmaⅠ完全切割图1中DNA片段.产生的末� 题目和参考答案——青夏教育精英家教网—

精英家教网 > 高中生物 > 题目详情

图1表示含有目的基因D的DNA片段长度（bp即碱基对）和部分碱基序列，图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列。现有MspⅠ、BamHⅠ、MboⅠ、SmaⅠ4种限制性核酸内切酶切割的碱基序列和酶切位点分别为C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG。请回答下列问题：

（1）图1的一条脱氧核苷酸链中，相邻两个脱氧核苷酸之间由　　　　　键连接。
（2）若用限制酶SmaⅠ完全切割图1中DNA片段，产生的末端是＿＿＿＿末端，其产物长度分别为＿＿＿。
（3）若图1中虚线方框内的碱基对被T－A碱基对替换，那么基因D就突变为基因d。从杂合子体细胞内分离出图1所示的DNA片段及其同源片段，用限制酶SmaⅠ完全切割，产物中共有＿＿＿＿＿种不同DNA片段。
（4）若将图2中质粒和目的基因D通过同种限制酶处理后，形成重组质粒，那么应选用的限制酶是＿＿＿＿＿。在导入重组质粒后，为了筛选出含重组质粒的大肠杆菌，一般需要用添加＿＿＿＿＿的培养基进行培养。经检测，部分含有重组质粒的大肠杆菌菌株中目的基因D不能正确表达，其最可能的原因＿＿＿＿＿＿＿＿＿。

(1)3，5磷酸二酯（键）
(2)平 537 bp、790 bp、661 bp （3分）
(3)4
(4)BamHⅠ　　抗生素 B　同种限制酶切割形成的末端相同,部分目的基因 D 与质粒反向连接

解析试题分析：⑴图1的一条脱氧核苷酸链中，相邻两个脱氧核苷酸之间由3，5磷酸二酯键连接。
⑵限制酶SmaⅠ的酶切位点是CCC↓GGG，完全切割图1中DNA片段，产生的末端是平末端；在图1中有两个限制酶SmaⅠ的酶切位点，DNA将被切割成三个片段，结合图解，三个片段的长度分别是537 bp、790 bp、661 bp。
⑶从杂合子体细胞内分离出图1所示的DNA片段及其同源片段，D基因片段有两个限制酶SmaⅠ酶切位点，完全切割后出现三个片段长度分别是537 bp、790 bp、661 bp，发生基因突变后的d基因片段只有一个限制酶SmaⅠ酶切位点，完全切割后出现两个片段长度分别是1327 bp、661 bp，所以图1所示的DNA片段及其同源片段被切割后共出现四种不同的DNA片段。
⑷在构建重组质粒时，目的基因D不能用限制酶MspⅠ和SmaⅠ，这两种限制酶切割的位点在目的基因的中间，如果切割目的基因D会被破坏；也不能用限制酶MboⅠ，它在目的基因上有两个酶切位点，如果切割质粒上的标记基因会被破坏，就没办法进行重组质粒的检测，故应选用限制酶BamHⅠ；用限制酶BamHⅠ切割质粒会破坏抗生素A抗性基因保留抗生素B抗性基因，为了筛选出含重组质粒的大肠杆菌，一般需要用添加抗生素B；如果含有重组质粒的大肠杆菌菌株目的基因D不能表达，则最可能的原因是同种限制酶切割形成的末端相同,部分目的基因 D 与质粒反向连接。
考点：本题考查基因工程操作的相关知识，意在考查考生能运用所学知识与观点，通过比较、分析与综合等方法对某些生物学问题进行解释、推理，做出合理的判断或得出正确的结论的能力。

练习册系列答案