Question

【题目】请回答下列问题

（1）为了从土壤中筛选能有效降解有害有机化合物A的细菌，研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基，成功地筛选出能高效降解化合物A的细菌（目的菌），从功能看该培养基为___________培养基，在对该菌进行分离、纯化、计数过程中，常采用___________法接种。实验过程中还需配制空白培养基作为对照，如果空白培养基中无菌落形成而实验组培养基中形成的菌落如图所示，造成这种结果的原因可能是___________。

（2）某植物富含果胶、淀粉、蛋白质和纤维素成分。在用该材料提取过果胶和淀粉后的剩渣加工饮料工艺研究中，将剩渣制成的汁液经蛋白酶和纤维素酶彻底酶解处理后，发现仍存在浑浊和沉淀问题，你将如何解决这一问题?____________________。在果汁生产中，为了提高果胶酶的使用效率和产品纯度，一般需要将酶用___________法进行固定化处理。

（3）用凝胶色谱法提取分离血红蛋白时，用_______________洗涤红细胞，用___________破裂红细胞使血红蛋白得以释放，如果装填的凝胶色谱柱中出现气泡，气泡会___________，降低分离效果。

Answer 1

【答案】选择 稀释涂布平板 土壤中含有4种能降解有机物A的细菌或培养基不纯含有其他碳源和氮源或接种过程被杂菌感染 在浑浊和有沉淀的汁液中加入果胶酶和淀粉酶 化学结合法或物理吸附法 生理盐水 蒸馏水和甲苯 搅乱蛋白质的洗脱次序

【解析】

由题文描述可知：该题考查学生对微生物的实验室培养、果胶酶在果汁生产中的作用与固定化酶、血红蛋白的提取和分离等相关知识的识记和理解能力。

(1)由题意“成功地筛选出能高效降解化合物A的细菌（目的菌）”可知：从功能上看，用于筛选该“目的菌”的培养基为选择培养基。纯化微生物时常用的接种方法是平板划线法和稀释涂布平板法，其中稀释涂布平板法常用于对目的菌进行分离、纯化、计数。实验过程中配制空白培养基作为对照的目的是验证培养基灭菌是否彻底或检测培养基平板灭菌是否合格。如果空白培养基中无菌落形成而实验组培养基中形成的菌落如图所示，则造成这种结果的原因可能是：土壤中含有4种能降解有机化合物A的细菌；或者是培养基不纯，含有其他碳源和氮源；或接种过程中被杂菌污染。

(2)依题意可知：导致浑浊和沉淀问题出现的原因是其汁液中仍存在少量果胶和淀粉，可见，为了解决这一问题，可在浑浊和有沉淀的汁液中加入果胶酶和淀粉酶。固定化酶是指用物理学或化学的方法将酶与固相载体结合在一起形成的仍具有酶活性的酶复合物。对于溶于水的果胶酶，一般采用化学结合法或物理吸附法将其固定在某种介质上，使之成为不溶于水而又有酶活性的制剂，进而提高果胶酶的使用效率和产品纯度。

(3)用凝胶色谱法提取分离血红蛋白时，从采集的血样中分离得到红细胞液体后，再向其中加入五倍体积的生理盐水对红细胞进行洗涤。红细胞释放血红蛋白，需加入蒸馏水和40%的甲苯，再在磁力搅拌器上充分搅拌10 min。装填凝胶色谱柱时，若产生气泡，则气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序，从而影响分离效果。