Question

6．（1）在大肠杆菌培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑温度、酸碱度、渗透压等条件（至少写上两项）．由于该细菌具有体积小、结构简单、变异类型容易选择、易培养、生活周期短等优点，因此常作为遗传学研究的实验材料．
（2）在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养皿进行灭菌静止空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使蛋白质变性，还能损伤DNA的结构．
（3）若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数，要想使所得估计值更接近实际值，除应严格操 作、多次重复外，还应保证待测样品稀释的比例合适．
（4）通常，对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的鉴定．
（5）培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染．对于固体培养基应采用的检测方法是将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生
（6）若进行大肠杆菌鉴定实验，应该在培养基中加入伊红和美蓝（染色剂），其菌落呈深紫色，并带有金属光泽．

Answer 1

分析 1、大肠杆菌是一种细菌，属于原核生物．大肠杆菌常作为遗传学研究的实验材料．
2、微生物营养成分主要有碳源、氮源、水和无机盐等，另外还需要注意渗透压、温度、pH 等条件．
3、微生物培养的关键是无菌技术，防止外来杂菌的污染．消毒和灭菌

	消毒	灭菌
概念	使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物（不包芽孢和孢子）	使用强烈的理化因素杀死物体内外所用的微生物（包括芽孢和孢子）
常用方法	煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学药剂消毒法、紫外线消毒法	灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌
适用对象	操作空间、某些液体、双手等	接种环、接种针、玻璃器皿、培养基等

4、培养基按功能分：

种类	制备方法	特征	用途
选择培养基	培养基中加入某种化学成分	根据某种微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计的培养基使混合菌样中的劣势菌变成优势菌，从而提高该菌的筛选率	加入青霉素分离得到酵母菌和霉菌
鉴别培养基	加入某种试剂或化学药品	依据微生物产生的某种代谢产物与培养基中特定试剂或化学药品反应，产生明显的特征变化而设计	鉴别和区分菌落相似的微生物伊红和美蓝培养基可以鉴别大肠杆菌

解答 解：（1）大肠杆菌具有体积小、结构简单、变异类型容易选择、易培养、生活周期短等优点；培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑温度、酸碱度和渗透压等条件．
（2）灭菌是用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，所以对培养基和培养皿进行灭菌；消毒是用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物，操作者的双手需要进行清洗和消毒，紫外线能使蛋白质变性，还能损伤DNA的结构．
（3）稀释涂布平板法是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养，应保证样品稀释的比例适合．
（4）对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的鉴定．
（5）培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染．对于固体培养基应采用的检测方法是将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生．
（6）若进行大肠杆菌鉴定实验，应该在培养基中加入伊红和美蓝，其菌落呈深紫色，并带有金属光泽．
故答案为：
（1）温度、酸碱度、渗透压     易培养、生活周期短
（2）灭菌    损伤DNA的结构
（3）比例合适
（4）鉴定
（5）将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生
（6）伊红和美蓝

点评 本题主要考查微生物培养的相关知识，意在强化学生对微生物培养过程的理解与运用．