Question

实验表明，乙植物的耐旱能力很差．某研究机构计划采用基因工程的方法，通过下图所示的程序培育耐旱的乙植物新品种：

请据图回答下列相关问题：
①通过PCR技术扩增耐旱基因时，需要Taq酶，该酶最大的特点是

 

．
②图中使用的载体最可能是

 

．在构建基因表达载体时，耐旱基因应该插入到该载体的

 

中．
③图中的载体上必须含有标记基因，以便检测

 

细胞和

 

细胞中是否导入了

 

．
④B过程中，常用

 

处理使细菌转化为感受态细胞，从而利于重组质粒的导入．D过程采用的方法是

 

．若把重组质粒导人动物细胞，常采用的方法是

 

．
⑤如果利用DNA分子杂交原理对再生植株进行检测，应该用

 

作为探针．
⑥若要利用蛋白质工程继续提高油料植物的出油率，其设计流程应从预期的

 

出发，设计预期的

 

结构，推测出应有的

 

序列，然后找到相对应的

 

序列，再用转基因技术改变现有性状．

Answer 1

考点：基因工程的原理及技术,植物培养的条件及过程

专题：

分析：分析题图：图示为培育耐旱的乙植物新品种的过程，其中A表示基因表达载体的构建过程；B表示将重组质粒导入农杆菌细胞；C表示用选择培养基筛选出含有重组质粒的农杆菌；D表示用含有重组质粒的农杆菌干扰乙植物体细胞，进而将目的基因导入受体细胞；最后采用植物组织培养技术将转基因细胞培育成转基因植株．

解答： 解：①PCR技术需要在较高温度条件下进行，因此需要耐高温DNA聚合酶，即Taq酶．
②图中将目的基因导入受体细胞的方法是农杆菌转化法，因此使用的载体最可能是Ti质粒；农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体的DNA上，因此在构建基因表达载体时，耐旱基因应该插入到该载体的T-DNA中．
③载体上必须含有标记基因，以便检测农杆菌细胞和乙植物的愈伤组织细胞中是否导入了目的基因．
④B表示将表达载体导入农杆菌的过程，该过程中常用CaCl₂（或Ca²⁺） 处理细菌使之转化为感受态细胞，从而利于重组质粒的导入．由图可知，D过程采用的方法是农杆菌转化法．将重组质粒导人动物细胞最有效的方法是显微注射法．
⑤探针是指用放射性同位素（或荧光分子）标记的含有目的基因DNA片段．因此，本实验中的探针是指放射性同位素标记的耐旱基因．
⑥蛋白质工程的设计流程：应从预期的蛋白质功能出发，设计预期的蛋白质结构，推测出应有的氨基酸序列，然后找到相对应的脱氧核苷酸序列，再用转基因技术改变现有性状．
故答案为：
①耐高温
②Ti质粒    T-DNA
③农杆菌    乙植物的愈伤组织     目的基因
④CaCl₂（或Ca²⁺）     农杆菌转化法    显微注射法
⑤放射性同位素标记的耐旱基因
⑥蛋白质功能     蛋白质    氨基酸    脱氧核苷酸

点评：本题结合培育耐旱的乙植物新品种的过程图解，考查基因工程和蛋白质工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理、工具及操作步骤，掌握各步骤中应注意的细节；识记蛋白质工程的概念及操作过程，能结合图中信息答题．