Question

科学家将外源目的基因与大肠杆菌的质粒进行重组，并在大肠杆菌中成功表达。下图表示构建重组质粒和筛选含目的基因的大肠杆菌的过程。请据图回答：

（1）步骤①和②中常用的工具酶是 __________。
（2）经过①②步骤后，有些质粒上的 ____ 基因内插入了外源目的基因，形成重组质粒。
（3）步骤③是   的过程。为了促进该过程，应该用 ________ 处理大肠杆菌。
（4）步骤④：将三角瓶内的大肠杆菌接种到含四环素的培养基C上培养，目的是筛选 _____________________。能在C中生长的大肠杆菌有 _____种。
（5）步骤⑤:用无菌牙签挑取C上的单个菌落，分别接种到D（含氨苄青霉素和四环素）和E（含四环素）两个培养基的相同位置上，一段时间后，菌落的生长状况如图所示。含目的基因的菌落位于（选填“D”或“E”） ______上，请在图中相应的位置上圈出来。

Answer 1

（1） 限制性核酸内切酶、DNA连接酶  。
（2）  氨苄青霉素抗性    。 
（3）将重组质粒（目的基因）导入大肠杆菌（受体细胞） ，  CaCl2溶液。
（4）含四环素抗性基因的大肠杆菌（含抗性基因的大肠杆菌给分，但回答含目的
基因的大肠杆菌不给分） ，      2        。
（5）       E      。
（在两个菌落中圈一个也可给1分）

解析