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【题目】研究发现,胃癌细胞与正常细胞相比,高尔基体上P115蛋白(囊泡转运蛋白)含量显著提高。为进一步确定P115与胃癌细胞增殖的关系,研究人员展开系列实验。

材料用具:胃癌细胞株,细胞培养液,含有P115-shRNA的表达载体(P115-shRNA可使P115基因沉默),空质粒,蛋白检测装置,血细胞计数板,显微镜、二氧化碳培养箱等实验思路及

1)将未导入质粒和导入空质粒的胃癌细胞株,编号为1号组、2号组,再设计一组________________作为3号组。成功转染后,将三组细胞放在培养液中,检测三组P115蛋白相对含量,结果如上图。其中属于实验组P115蛋白含量的是________________

2)将三组细胞及培养液放在________中,适宜条件下培养一段时间,实验开始及每隔24h测定各组细胞数量相对值。请画出用于记录各组72h内细胞数量相对值的三线表________

372小时后,进一步测定三个组处于细胞周期各时期细胞数,计算百分比,结果如下图。

由上图可知P115-shRNA通过________________来抑制胃癌细胞的增殖。

4)结合上述研究,提出治疗胃癌的思路________________

5)体内的胃癌细胞的清除主要依赖________________免疫。而在该免疫过程中,加入佐剂S能使抗原在吞噬细胞中停留的时间延长。综合上述研究,推测佐剂S通过________________,加强机体对胃癌细胞的免疫应答。

【答案】含有P115-shRNA的表达载体 c 二氧化碳培养箱 P115与胃癌细胞增殖的关系研究中细胞数目相对值的结果记录表 抑制DNA分子复制(或阻滞细胞从G1期进入S期) 降低P115蛋白的含量(使P115蛋白的基因沉默;抑制P115蛋白基因的表达使用能够抵消P115蛋白作用的药物;使用能够阻止胃癌细胞进入S期的药物) 细胞 使抗原在吞噬细胞中停留时间增加,有利于抗原的处理和呈递,促进T细胞的活化

【解析】

根据题意胃癌细胞与正常细胞相比,高尔基体上P115蛋白(囊泡转运蛋白)含量显著提高,说明P115蛋白与癌细胞的增殖有关,若抑制P115蛋白基因表达,则该蛋白含量减少,癌细胞的增殖受抑制。

1)根据题意可知,本实验是确定P115与胃癌细胞增殖的关系,自变量为是否有P115,已知P115-shRNA可使P115基因沉默,即能使P115基因不表达,为了排除质粒对实验结果的影响,还应该设置一组导入空质粒的做对照,故实验组和对照组的处理为:将未导入质粒和导入空质粒的胃癌细胞株,编号为1号组、2号组,再设计一组含有P115-shRNA的表达载体作为3号组。成功转染后,将三组细胞放在培养液中,检测三组P115蛋白相对含量,结果如图一。由于P115-shRNA可使P115基因沉默,即细胞不含P115,所以图中属于实验组P115蛋白含量的是c

2)将三组细胞及培养液放在二氧化碳培养箱中,适宜条件下培养一段时间,实验开始及每隔24h测定各组细胞数量相对值,用于记录各组72h内细胞数量相对值的三线表为:

3)根据柱形图可知,1号组和2号组中的S期细胞数比例相等,但均大于3号组,1号组和2号组中的G1期细胞数比例相等,但均小于3号组,三组的DNA复制后期~分裂期细胞数比例均相等,说明P115-shRNA通过抑制DNA分子复制来抑制胃癌细胞的增殖。

4)由题图研究可以推测,治疗胃癌的思路是:降低P115蛋白的含量;使P115蛋白的基因沉默;抑制P115蛋白基因的表达;使用能够抵消P115蛋白作用的药物;使用能够阻止胃癌细胞进入S期的药物等均能抑制癌细胞的增殖。

5)体内的胃癌细胞的清除主要依赖细胞免疫。而在该免疫过程中,加入佐剂S能使抗原在吞噬细胞中停留的时间延长,推测佐剂S通过使抗原在吞噬细胞中停留时间增加,有利于抗原的处理和呈递,促进T细胞的活化,加强机体对胃癌细胞的免疫应答。

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