如图表示以鸡血为实验材料进行DNA的粗提取与鉴定的操作程序.请分析回答下列问题:(1)步骤一中.向鸡血细胞液中加入蒸馏水并搅拌.可使鸡血细胞破裂．(2)步骤二中.过滤后收集含有DNA的滤液．(3)步骤三.四的操作原理是DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同而去除杂质.步骤四的主要操作是滴加蒸馏水并搅拌.当观察到溶液中絮状物不再增加时.� 题目和参考答案——青夏教育精英家教网—

16．如图表示以鸡血为实验材料进行DNA的粗提取与鉴定的操作程序，请分析回答下列问题：

（1）步骤一中，向鸡血细胞液中加入蒸馏水并搅拌，可使鸡血细胞破裂．
（2）步骤二中，过滤后收集含有DNA的滤液．
（3）步骤三、四的操作原理是DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同而去除杂质，步骤四的主要操作是滴加蒸馏水并搅拌，当观察到溶液中絮状物不再增加时，操作停止，过滤去除溶液中的杂质．
（4）氯仿密度大于水，能使蛋白质变性沉淀，与水和DNA均不相溶，且对DNA影响极小．为了进一步提高DNA纯度，依据氯仿的特性，步骤七的具体操作是将步骤六获得的滤液与等量的氯仿充分混合，静置一段时间，吸取上清液，然后加入等体积的、冷却的酒精，静置2～3min，溶液中会出现白色丝状物，这就是粗提取的DNA．
（5）步骤八：DNA遇二苯胺试剂，沸水浴5min，冷却后，溶液呈蓝色．

分析 DNA粗提取和鉴定的过程：
（1）实验材料的选取：凡是含有DNA的生物材料都可以考虑，但是使用DNA含量相对较高的生物组织，成功的可能性更大．
（2）破碎细胞，获取含DNA的滤液：
动物细胞的破碎比较容易，以鸡血细胞为例，在鸡血细胞液中加入一定量的蒸馏水，同时用玻璃棒搅拌，过滤后收集滤液即可．如果实验材料是植物细胞，需要先用洗涤剂溶解细胞膜．例如，提取洋葱的DNA时，在切碎的洋葱中加入一定的洗涤剂和食盐，进行充分的搅拌和研磨，过滤后收集研磨液．
（3）去除滤液中的杂质：
方案一的原理是DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同；方案二的原理是蛋白酶分解蛋白质，不分解DNA；方案三的原理是蛋白质和DNA的变性温度不同．
（4）DNA的析出与鉴定
①将处理后的溶液过滤，加入与滤液体积相等、冷却的酒精溶液，静置2～3min，溶液中会出现白色丝状物，这就是粗提取的DNA．用玻璃棒沿一个方向搅拌，卷起丝状物，并用滤纸吸取上面的水分．
②取两支20ml的试管，各加入物质的量浓度为2mol/L的NaCl溶液5ml，将丝状物放入其中一支试管中，用玻璃棒搅拌，使丝状物溶解．然后，向两支试管中各加入4ml的二苯胺试剂．混合均匀后，将试管置于沸水中加热5min，待试管冷却后，比较两支试管溶液颜色的变化，看看溶解有DNA的溶液是否变蓝．

解答解：（1）步骤一中，利用渗透原理，向鸡血细胞液中加入蒸馏水并搅拌，可使鸡血细胞破裂．
（2）步骤二中，过滤后收集含有DNA的滤液．
（3）步骤三、四的操作原理是DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同；步骤四通过向溶液中加入蒸馏水可降低DNA的溶解度，使DNA析出，当观察到溶液中絮状物不再增加时，停止操作，过滤去除溶液中的杂质．
（4）氯仿密度大于水，能使蛋白质变性沉淀，与水和DNA均不相溶，且对DNA影响极小．为了进一步提高DNA纯度，依据氯仿的特性，步骤七的具体操作是将步骤六获得的滤液与等量的氯仿充分混合，静置一段时间，DNA分布在上清液中，因此吸取上清液；然后加入等体积的冷却的酒精，静置2～3min，由于DNA不溶于酒精，因此溶液中会出现白色丝状物，这就是粗提取的DNA．
（5）步骤七：DNA遇二苯胺试剂，沸水浴5min，冷却后，溶液呈蓝色．
故答案为：
（1）蒸馏水
（2）滤液　
（3）不同浓度的NaCl溶液　絮状物不再增加
（4）上清液　酒精　
（5）二苯胺　蓝

点评本题考查DNA的粗提取和提纯，对于此类试题，需要考生注意的细节较多，如实验的原理、实验步骤、实验采用的试剂及试剂的作用等，需要考生在平时的学习过程中注意积累．

练习册系列答案

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