Question

17．植物甲具有极强的耐旱性，其耐旱性与某个基因有关．若从该植物中获得该耐旱基因，并将其转移到耐旱性低的植物乙中，有可能提高后者的耐旱性．
回答下列问题：
（1）理论上，基因组文库含有生物的全部基因；而cDNA文库中含有生物的部分基因．
（2）将耐旱基因导入农杆菌，并通过农杆菌转化法将其导入植物乙的体细胞中，经过一系列的过程得到再生植株．如果检测结果呈阳性，再在田间试验中检测植株的耐旱性是否得到提高．
（3）假如用得到的二倍体转基因耐旱植株自交，子代中耐旱与不耐旱植株的数量比为3：1时，则可推测该耐旱基因整合到了同源染色体的一条上（填“同源染色体的一条上”或“同源染色体的两条上”）．
（4）耐旱基因与载体用限制酶切割后，通过DNA连接酶连接，以构建重组表达载体．检测目的基因是否已插入受体细胞DNA，可采用DNA分子杂交技术．
（5）若利用植物体细胞杂交培育优良品种，则必须用纤维素酶和果胶酶出去杂交细胞的细胞壁，用促溶剂诱导融合，再进行植物组织培养技术获得杂交植株，所依据的原理是植物细胞的全能性．

Answer 1

分析 1、基因文库是指将含有某种生物不同基因的许多DNA片段，导入到受体菌的群体中储存，各个受体菌分别含有这种生物的不同基因．
基因组文库包含某种生物所有的基因；部分基因文库包含某种生物的部分基因．如：cDNA文库．
2、将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．
3、目的基因的检测与鉴定：（1）分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．（2）个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．

解答 解：（1）基因组文库含有某种生物的全部基因；cDNA文库中只含有该种生物的部分基因．
（2）由于植物乙的耐旱性低，因此将耐旱基因导入农杆菌，并通过农杆菌转化法将其导入植物乙的体细胞中，经过一系列的过程得到再生植株．要确认该耐旱基因是否在再生植株中正确表达，应检测此再生植株中该基因的表达产物，如果检测结果呈阳性，再在田间试验中检测植株的耐旱性是否得到提高．
（3）假如用得到的二倍体转基因耐旱植株自交，子代中耐旱与不耐旱植株的数量比为3：1时，该比例符合杂合子（Aa）自交后代的结果，则可推测该耐旱基因（A）整合到了同源染色体的一条上．
（4）耐旱基因与载体用同种限制性核酸内切酶（或同种限制酶）切割，形成相同的黏性末端，然后再通过DNA连接酶连接，以构建重组表达载体．检测目的基因是否已插入受体细胞DNA，可采用DNA分子杂交（或核酸探针）技术．
（5）在进行植物体细胞杂交时需要使用纤维素酶和果胶酶去掉植物细胞的细胞壁，进行植物原生质体的融合，最终通过植物组织培养 技术获得杂交植株，其原理是植物细胞的全能性．
故答案为：
（1）全部      部分   
（2）乙       耐旱性
（3）同源染色体的一条上
（4）限制酶  DNA连接酶   DNA分子杂交
（5）纤维素  果胶  植物组织培养   植物细胞的全能性

点评 本题考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因文库的种类，掌握两种基因文库的区别；识记PCR技术的条件；识记基因工程的具体操作步骤及相关细节，能结合所学的知识准确答题．