Question

8．（1）在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养皿进行灭菌（消毒、灭菌）；操作者的双手需要进行清洗和消毒；静止空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使蛋白质变性，还能损伤DNA的结构．
（2）若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数，要想使所得估计值更接近实际值，除应严格操作、多次重复外，还应保证待测样品稀释的比例合适．
（3）通常，对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的鉴定（或分类）．
（4）培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染．对于固体培养基应采用的检测方法是将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生．
（5）若用大肠杆菌进行实验，使用过的培养基及其培养物必须经过灭菌处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散．

Answer 1

分析 无菌技术的主要内容：
①对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和消毒；
②将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌；
③为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行；
④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触．

解答 解：（1）在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养皿进行灭菌；操作者的双手需要进行清洗和消毒；静止空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使蛋白质变性，还能损伤DNA的结构．
（2）若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数，要想使所得估计值更接近实际值，除应严格操作、多次重复避免偶然误差，还应保证待测样品稀释的比例合适，使每个平板上的菌落数在30～300之间．
（3）通常，对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的鉴定（或分类）．
（4）培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染．对于固体培养基应采用的检测方法是将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生．
（5）若用大肠杆菌进行实验，使用过的培养基及其培养物必须经过灭菌处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散．
故答案为：
（1）灭菌  消毒  损伤DNA的结构
（2）比例合适
（3）鉴定（或分类）
（4）将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生
（5）灭菌

点评 本题着重考查了微生物分离与培养的有关知识，要求考生掌握无菌技术的主要内容，识记紫外线消毒的原理，同时要求考生具有一定的实验操作能力．