[题目]产脂肪酶酵母可用于含油废水处理.为筛选产脂肪酶酵母菌株.科研人员开展了相关研究.请回答下列问题:(1)常规微生物实验中.下列物品及其灭菌方法错误的是 .编号①②③④物品培养基接种环培养皿涂布器灭菌方法高压蒸汽火焰灼烧干热臭氧(2)称取1．0g某土壤样品.转入99mL无菌水中.制备成菌悬液.经后.获得细胞密度不同的菌悬液.分别取0� 题目和参考答案——青夏教育精英家教网—

【题目】产脂肪酶酵母可用于含油废水处理。为筛选产脂肪酶酵母菌株，科研人员开展了相关研究。请回答下列问题：

（1）常规微生物实验中，下列物品及其灭菌方法错误的是__________（填编号）。

编号	①	②	③	④
物品	培养基	接种环	培养皿	涂布器
灭菌方法	高压蒸汽	火焰灼烧	干热	臭氧

（2）称取1．0g某土壤样品，转入99mL无菌水中，制备成菌悬液，经__________后，获得细胞密度不同的菌悬液。分别取0．1mL菌悬液涂布在固体培养基上，其中10倍稀释的菌悬液培养后平均长出了46个酵母菌落，则该样本中每克土壤约含酵母菌__________个。

（3）为了进一步提高酵母菌产酶能力，对分离所得的菌株，采用射线辐照进行__________育种。将辐照处理后的酵母菌涂布在以__________为唯一碳源的固体培养基上，培养一段时间后，按照菌落直径大小进行初筛，选择直径__________的菌落，纯化后获得A、B两突变菌株。

（4）在处理含油废水的同时，可获得单细胞蛋白，实现污染物资源化。为评价A、B两菌株的相关性能，进行了培养研究，结果如图。据图分析，应选择菌株__________进行后续相关研究，理由是__________。

【答案】④ 梯度稀释 4．6×105（或460000）诱变脂肪（或油脂）较大 B 该菌株增殖速度快，单细胞蛋白产量高；降解脂肪能力强，净化效果好

【解析】

灭菌指用强烈的物理或化学方法杀灭所有微生物，包括致病的和非致病的，以及细菌的芽胞．常用灭菌方法：灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌法。高压蒸汽灭菌适用于对一般培养基和玻璃器皿的灭菌，干热灭菌适用于空玻璃器皿的灭菌，微生物接种时的金属接种工具和试管口可以用灼烧灭菌。稀释平板计数是根据微生物在固体培养基上所形成的单个菌落，即是由一个单细胞繁殖而成这一培养特征设计的计数方法，即一个菌落代表一个单细胞。将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释程度的菌液分别涂布到固体培养基的表面，使其均匀分布于平板中的培养基内，经培养后，由单个细胞生长繁殖形成菌落，统计菌落数目，即可计算出样品中的含菌数。

（1）培养基一般进行高压蒸汽灭菌，接种环可用火焰灼烧灭菌，培养皿一般通过干热灭菌，涂布器应该用酒精引燃灭菌；故①②③正确，错误的是④。

（2）稀释涂布平板法是将样品进行一系列梯度稀释后，获得细胞密度不同的菌悬液，然后涂布到平板上。根据题意，1.0g土壤样品转入99mL无菌水中，制备成菌悬液，经系列梯度稀释后，分别取0.1mL菌悬液涂布在固体培养基上，则稀释的倍数为1000倍，其中10倍稀释的菌悬液培养后长出了46个酵母菌落，则总的稀释倍数为10000倍，故每克土壤中含酵母菌数为46×10000=4.6×105个。

（3）根据题意，欲提高酵母菌产酶能力，可对分离得到的产脂肪酶酵母菌菌株进行射线辐射，该育种方式为诱变育种。为了能筛选出符合要求的产脂肪酶酵母菌突变株，可配制以脂肪为唯一碳源的培养基，将辐射处理的酵母菌涂布在该固体培养基上，形成单菌落；产脂肪酶能力越强的酵母菌，分解利用脂肪的能力越强，菌落生长越好，一段时间后，按照菌落直径大小进行初筛，选取直径较大的菌落即可。

（4）据题图分析可知，相同时间内，菌株B的细胞密度高于菌株A，而菌株B的脂肪剩余量低于菌株A的脂肪剩余量，故进行相关研究可选择菌株B，原因是菌株B增殖速度快，单细胞蛋白的产量也高，同时降解脂肪的能力强，净化效果更好。

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实验研究中常用叶绿素荧光参数描述光合作用生理状况。其中F0是在只引发荧光不引起光反应的很弱的光照下测得的叶绿素荧光参数，F0的大小可以反映叶绿素含量的多少，Fm是在关闭光反应时的叶绿素的最大荧光参数；（Fm-F0）/ Fm表示光反应的最大光能转换效率。经检测，ALA处理西瓜叶片叶绿素荧光数值如下表，遮荫显著影响西瓜叶片叶绿素荧光_______（F0值或Fm值），说明遮荫条件下_________含量增加，但ALA处理对西瓜叶片叶绿素荧光___________（“显著提高”或“显著降低”或“无显著影响”）。

处理	F0	Fm	（Fm-F0）/ Fm
未遮荫	0．3126	1．6187	0．8068
遮荫	0．3689	1．7271	0．7859
ALA处理+遮荫	0．3634	1．6789	0．7831

（3）用ALA处理西瓜，测定其净光合作用速率和胞间二氧化碳浓度，结果如下：

实验结果说明，ALA的作用是________________________。请结合以上研究分析遮荫条件下西瓜胞间二氧化碳浓度增加的可能原因是_________________________。

（4）若要研究ALA对盐胁迫下的无土栽培的西瓜光合作用速率的影响，实验组的处理为______

A．正常营养液中加入氯化钠，保持其浓度为75mmol/L

B．正常营养液中加入ALA，保持其浓度为50mg/L

C．正常营养液中加入氯化钠（浓度保持在75mmol/L）和ALA（浓度保持在50mg/L）

D．正常营养液中加入一定量的清水

（5）研究发现ALA是叶绿素合成的前体，请结合以上研究判断ALA _____(“是”或“不是”)植物激素，理由是____________________________。

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