Question

4．请分析回答下列有关生物技术实践的问题：
（1）制备牛肉膏蛋白胨固体培养基，倒平板时，需要等待平板冷却凝固（50℃）后，将平板倒过来放置．微生物接种的方法，最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法，后者是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，单个进行培养．菌落是在固体培养基上由细胞繁殖而来的形态可见的子细胞群体．
（2）对月季进行组织培养时，适宜花药培养的时期是期，为确定花粉是否处于该时期，镜检时最常用的染色方法是．
（3）测定亚硝酸盐含量的原理是玫瑰红，在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸生重氮化反应后，与N-l-萘基乙二胺盐酸盐结合形成色染料．
（4）用萃取法提取胡萝卜素的实验中，要将胡萝卜进行粉碎和干燥的目的是使原料与有机溶剂充分接触，增大溶解度；得到的萃取液需要用蒸馏方法进行浓缩．

Answer 1

分析 筛选和分离目的微生物常用的接种方法是平板划线法和稀释涂布平板法，分离微生物的一般步骤是：土壤取样、选择培养、梯度稀释、涂布培养和筛选菌株．花药组织培养的取材应通过镜检选用单核靠边期的花粉，成功率最高．在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸 生重氮化反应后，与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料．胡萝卜素的提取常用萃取法，提取流程为：胡萝卜-粉碎-干燥-萃取-过滤-浓缩-胡萝卜素．

解答 解：（1）制作培养基倒平板时应该等待平板冷却凝固（50℃）后倒置．在进行稀释涂布平板法接种操作之前应该讲菌液进行梯度稀释．菌落是固体培养基上由单个细胞繁殖而来的形态可见的子细胞群体．
（2）花药组织培养的取材应通过镜检选用单核靠边期的花粉，成功率最高．镜检时最常用的染色方法是醋酸洋红法．
（3）在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸 生重氮化反应后，与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料，据此可以使用比色法测定亚硝酸盐含量．
（4）用萃取法提取胡萝卜素的实验中，要将胡萝卜进行粉碎和干燥的目的是使原料与有机溶剂充分接触，增大溶解度．浓缩时需要将得到的萃取液需要用蒸馏方法除去萃取剂．
故答案为：
（1）凝固（50℃）   梯度稀释   单个
（2）单核     醋酸洋红法
（3）玫瑰红
（4）使原料与有机溶剂充分接触，增大溶解度   蒸馏

点评 本题综合考查了生物技术实践的相关知识，意在强化学生对全部教材内容的识记、理解与运用．