[题目]科研人员采用转基因体细胞克隆技术获得转基因绵羊.以便通过乳腺生物反应器生产人凝血因子IX医用蛋白.其技术路线如图所示:(1)研究人员在过程①中.利用PCR技术扩增人凝血因子IX基因时.除了酶.引物.模板以外.还需要加入作为合成DNA的原料,PCR过程中需要不断调整反应体系的温度.一般情况下.至少需要个不同的反应温度.(2)通� 题目和参考答案——青夏教育精英家教网—

【题目】科研人员采用转基因体细胞克隆技术获得转基因绵羊，以便通过乳腺生物反应器生产人凝血因子IX医用蛋白，其技术路线如图所示：

（1）研究人员在过程①中，利用PCR技术扩增人凝血因子IX基因时，除了酶、引物、模板以外，还需要加入____________作为合成DNA的原料；PCR过程中需要不断调整反应体系的温度，一般情况下，至少需要______个不同的反应温度。

（2）通过步骤②获得的A，除了人凝血因子IX基因外，还含有_______________________（至少三个）等结构。

（3）过程④指_______________，重组胚胎可以与普通代孕母羊的子宫建立正常的生理和组织联系，但是出生后的转基因绵羊依然具有生产人凝血因子IX医用蛋白的能力，原因是___________________________________。

（4）理论上，可以通过少量整合有目的基因的成纤维细胞，克隆出大量转基因绵羊，请对这一问题做出两个合理的解释： ___________________；____________________。

【答案】 dATP、dGTP、dCTP、dTTP（或dNTPs） 3 启动子、终止子、复制原点、标记基因胚胎移植移入受体的供体胚胎的遗传特性，在孕育过程中不受任何影响整合有目的基因的成纤维细胞可以进行传代培养转基因绵羊的体细胞可以作为供体细胞，克隆更多转基因绵羊

【解析】试题分析：本题综合考查学生对基因工程的知识的识记和理解能力。解答本题需熟记并理解基因工程的基本操作程序并形成清晰的知识网络。在此基础上，结合问题情境，从题意和题图中提取有效信息并与胚胎工程、核移植等知识建立联系，进行相关问题的解答。

(1)利用PCR技术扩增人凝血因子IX基因时，除了酶、引物、模板以外，还需要加入dATP、dGTP、dCTP、dTTP（或dNTPs）。PCR过程中需要不断调整反应体系的温度，一般情况下，至少需要3个不同的反应温度，即温度上升到90℃至95℃时双链DNA解聚为单链，温度降到55℃至60℃时两种引物通过碱基互补配对与两条DNA单链结合，温度上升到70℃至75℃时进行子链的延伸。

(2)通过步骤②获得的A为基因表达载体，该基因表达载体除了人凝血因子IX基因（目的基因）外，还含有启动子、终止子、复制原点、标记基因。

(3)过程④指胚胎移植。由于移入受体的供体胚胎的遗传特性，在孕育过程中不受任何影响，所以出生后的转基因绵羊依然具有生产人凝血因子IX医用蛋白的能力。

(4)因整合有目的基因的成纤维细胞可以进行传代培养，加之转基因绵羊的体细胞可以作为供体细胞，克隆更多转基因绵羊，所以理论上，可以通过少量整合有目的基因的成纤维细胞，克隆出大量转基因绵羊。

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