Question

【题目】【生物——选修1：生物技术实践】苹果园广泛使用的一种除草剂（含氮有机物）在土壤中不易被降解，长期使用可污染土壤。为修复被该除草剂污染的土壤，科学工作者按甲图程序选育能降解该除草剂的细菌（已知该除草剂在水中溶解度低，含一定量该除草剂的培养基不透明）。

（1）制备土壤浸出液时，为避免菌体浓度过高，需将浸出液进行稀释处理。现有一升土壤浸出液，用无菌吸管吸取1 mL液样至盛有9 mL无菌水的试管中，再稀释103倍。各取0．1 mL已稀释103倍的水样分别接种到三个培养基上培养，记录的菌落数分别为55、56、57，则每升原土壤浸出液样中菌体数为____________。

（2）科学工作者为修复被该除草剂污染土壤的目的来选择细菌，所用培养基应该___________。

（3）接种技术的核心是__________。在划线接种时，连续划线的目的是将聚集的菌种逐步____________，培养时，只有很少菌落出现，大部分细菌在此培养基上不能生长的主要原因是_____________或有氧条件抑制了这些细菌的生长。

（4）在培养基上形成的菌落中，无透明带菌落利用的氮源主要是_________，有透明带菌落利用的氮源主要是_________，据此可筛选出目的菌。实验结果如乙图显示的A～E五种菌株中，_________是最理想菌株。

Answer 1

【答案】（1）5．6×109 （2）在无氮培养基添加了该除草剂

（3）防止杂菌污染，保证培养物的纯度 稀释获得单个菌落 培养基中缺少这些细菌可利用的氮源

（4）氮气 该除草剂 E

【解析】（1）制备土壤浸出液时，为避免菌体浓度过高，需将浸出液进行稀释处理。现有一升土壤浸出液，用无菌吸管吸取1 mL液样至盛有9 mL无菌水的试管中，再稀释103倍。各取0．1 mL已稀释103倍的水样分别接种到三个培养基上培养，记录的菌落数分别为55、56、57，则每升原土壤浸出液样中菌体数为（55+56+57）/3x103x1000x10x10=5．6×109个。

（2）科学工作者为修复被该除草剂污染土壤的目的来选择细菌，所用培养基应该在无氮培养基中添加了该除草剂，即选择除草剂为唯一有机氮源。

（3）接种技术的核心是防止杂菌污染，保证培养物的纯度。在划线接种时，连续划线的目的是将聚集的菌种逐步稀释以获得单个菌落；培养时只有很少菌落出现，大部分细菌在此培养基上不能生长的主要原因是培养基中缺少这些细菌可利用的氮源或有氧条件抑制了这些细菌的生长。

（4）在培养基上形成的菌落中，无透明带菌落利用的氮源主要是氮气，有透明带菌落利用的氮源主要是该除草剂，据此可筛选出目的菌。由于理想菌株分解除草剂的能力最强，故在含除草剂的培养基中形成的透明带最大，所以实验结果A～E五种菌株中，E是最理想菌株。