Question

18．氯苯化合物是重要的有机化工原料，因其不易降解，会污染环境．某研究小组依照下图1所示实验方案筛选出能高效降解氯苯的微生物SP1菌．培养基配方如表1．

液体培养基	蛋白胨	牛肉膏	氯苯	氯化钠	硝酸铵	无机盐（无碳）	蒸馏水
Ⅰ号	10g	5g	5mg	5g	-	-	1L
Ⅱ号	-	-	50mg	5g	3g	适量	1L
Ⅲ号	-	-	20mg-80mg	5g	3g	适量	1L

（1）从用途上来说，Ⅱ号培养基属于选择培养基，在Ⅱ号培养基中，为SP1菌提供氮源的成分是硝酸铵．配制Ⅱ号固体培养基时，除添加Ⅱ号液体培养基成分外，还应添加1%的琼脂．
（2）培养基配制时，灭菌与调pH的先后顺序是先调pH，后灭菌．实验室中，培养基灭菌常用的方法是高压蒸汽灭菌．
（3）将Ⅰ号培养基中的微生物接种Ⅱ号培养基中，采用的最佳接种方法是稀释涂布平板法，将SP1菌接种在含不同浓度氯苯的Ⅲ号培养液中培养，得到生长曲线如图2所示，此过程采用抽样检测法（血球计数板计数法）（方法）统计菌体数．从图中可知，SP1菌在20mg/L培养条件下最早停止生长，其原因是氯苯碳源最早耗尽．

Answer 1

分析 （1）培养基为微生物提供生长、繁殖和积累代谢产物的营养物质．营养物质归纳为碳源、氮源、生长因子、无机盐和水．根据化学成分分为合成培养基、天然培养基等；根据用途分选择培养基、鉴别培养基；根据性质分为液体、半固体和固体培养基．
（2）制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤：计算、称量、溶化、调整PH、灭菌、倒平板．

解答 解：（1）Ⅱ号培养基以氯苯为唯一碳源，属于选择培养基，目的是选择出SP1菌株；Ⅱ号培养基成分中含氮物质为硝酸铵，可以为SP1菌株提供氮源；固体培养基需要添加凝固剂，常用的凝固剂是琼脂．
（2）为了防止杂菌污染，配置培养基时，应该先调节pH，然后灭菌．实验室中，培养基灭菌常用的方法是高压蒸汽灭菌．
（3）据图1分析可知，将Ⅰ号培养基中的微生物接种到Ⅱ号培养基中，采用的最佳接种方法是稀释涂布平板法．SP1菌的计数常用抽样检测法（血球计数板计数法）．SP1菌株能以氯苯为碳源，当氯苯消耗尽时，菌株因缺少碳源而不能继续生存，故氯苯含量越少，SP1菌株越早停止生长．
故答案为：
（1）选择    硝酸铵    琼脂
（2）先调pH，后灭菌    高压蒸汽灭菌    
（3）稀释涂布平板法     抽样检测法（血球计数板计数法）    20mg/L    氯苯碳源最早耗尽

点评 本题结合图表，考查微生物的培养和分离，要求考生识记培养基的成分、种类及作用；识记接种微生物常用的两种方法及注意事项，能结合图中和表中信息准确答题．