Question

（2007，天津）在培育转基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因（）常作为标记基因，只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长。下图为获得抗虫棉的技术流程

请据上图回答：

（1）A过程需要的酶有________。

（2）B过程及其结果体现了质粒作为运载体必须具备的两个条件是________。

（3）C过程的培养基除含有必要营养物质、琼脂和激素外，还必须加入________。

（4）如果利用DNA分子杂交原理对再生植株进行检测，D过程应该用________作为探针。

（5）科学家发现转基因植株的卡那霉素抗性基因的传递符合孟德尔遗传规律。

①将转基因植株与________杂交，其后代中抗卡那霉素型与卡那霉素敏感型的数量比为1∶1。

②若该转基因植株自交，则其后代中抗卡那霉素型与卡那霉素敏感型的数量比为________。

③若将该转基因植株的花药在卡那霉素培养基上作离体培养，则获得的再生植株群体中抗卡那霉素型植株占________％。

Answer 1

答案：
解析：

（1）限制性内切酶和DNA连接酶 （2）具有标记基因；能在宿主细胞中复制并稳定地保存 （3）卡那霉素 （4）放射性同位素（或荧光分子）标记的抗虫基因 （5）①非转基因植株　②3∶1　③100 点拨：（1）在基因工程中构建重组质粒，需用限制性内切酶将目的基因取出，并将质粒切断使之露出黏性末端。还需用DNA连接酶将目的基因与质粒连接在一起。 （2）只有含卡那霉素抗性基因（）即标记基因的土壤农杆菌，才能在特定的选择性培养基中生存、繁殖。这既体现了质粒需具有标记基因的特点，又体现了质粒能在宿主细胞中复制并稳定保存的特点。 （3）C过程的培养基应是选择性培养基，通过培养，应将含有卡那霉素抗性基因（）的细胞选择出来，故培养基中应含卡那霉素。 （4）检测再生植株是否含有目的基因——抗虫基因，应该用放射性同位素（或荧光分子）标记的抗虫基因作为探针，这样易于杂交和检测。 （5）转基因植株的卡那霉素抗性基因的传递符合孟德尔遗传定律，说明该基因整合到细胞核中的DNA分子上，且为显性基因。那么，该转基因植株（显性、杂合子）与非转基因植物（隐性、纯合子）杂交，其后代显性（抗卡那霉素型）与隐性（卡那霉素敏感型）的数量比应为1∶1。该转基因植株（显性、杂合子）自交，其后代显性与隐性的比为3∶1。在含有卡那霉素的培养基上，只有含抗卡那霉素基因的花药才能生存，则获得的再生植株群体中抗卡那霉素型植株占100％。