Question

【题目】我国饮用水卫生标准规定每毫升水样中细菌总数不得大于100个，大肠杆菌不得检出。某兴趣小组为测定本地自来水中的细菌总数和是否有大肠杆菌，进行了如下实验：

①分别配制营养琼脂培养基（成分：牛肉膏、蛋白胨、NaCI、琼脂、H20）和伊红美蓝培养基（成分：蛋白胨、NaCl、琼脂、乳糖、伊红、美蓝、H2O），灭菌。

②取水样。

③先测定甲项指标：用灭菌吸管吸取ImL水样，涂布到营养琼脂培养基中；置于37 ℃培养24h后进行菌落计数。另设一个不加水样的空白对照组。

④用滤膜法测定乙项指标，装置和操作如下图。

回答下列问题：

(1)步骤②取水样前应先将自来水龙头用火焰灼烧3min，目的是_____。

(2)步骤③测定的指标甲是__。水样涂布前无需稀释，理由是____。

(3)步骤④测定乙项指标，主要观察滤膜上是否会出现 ___色菌落。配制伊红美蓝培养基时，先用蛋白胨、NaCl、琼脂配制基础培养基，在l00kPa、121℃条件下灭菌后，冷却至60。C左右，再加入经70kPa、115℃条件下灭菌的乳糖、伊红、美蓝水溶液，后者灭菌条件不同的原因是____。

(4)兴趣小组认为合格的自来水中细菌数量很少，担心检测不到，因而将取得的水样先加入到无琼脂的营养培养液中培养一段时间后，再稀释涂布平板计数。这样操作获得的数据___ （填“可信”或“不可信”）．理由是____。

Answer 1

【答案】灭菌 细菌总数 自来水中细菌数量很少 紫黑 溶液中的乳糖高温下会破坏 不可信 细菌会在营养培养液中大量繁殖，其数量不能真实反映水样中原有的数量

【解析】

本实验应用到琼脂，是固体培养基，伊红美蓝培养基是一种鉴别培养基，大肠杆菌在伊红美蓝培养基上可呈现深紫色并带有金属光泽。题中指标甲是细菌总数，指标乙是大肠杆菌数。

（1）实验过程要进行严格的灭菌，水龙头用火焰灼烧3min，目的就是灭菌。

（2）实验过程首先要测定细菌的总数，再测定大肠杆菌数，因为自来水中细菌数量很少，所以水样涂布前无需稀释。

（3）指标乙是大肠杆菌，大肠杆菌在伊红美蓝培养基上会呈现紫黑色并带有金属光泽。后者灭菌条件比前者所需要的温度及压强都低，是因为后者操作过程加入了乳糖，溶液中的乳糖高温下会破坏。

（4）若将水样先加入到无琼脂的营养培养液中培养一段时间后，则原有水样中的细菌就会在培养液中繁殖，稀释涂布平板计数得到的数量不能真实反映水样中原有的数量，因此这样操作获得的数据是不可信的。