Question

14．请回答下列有关胚胎工程和基因工程方面的问题：
（1）理论上 cDNA 文库含有生物的部分基因．
（2）目前，科学家通过细胞核移植实验，培育出多种哺乳动物新类型．在哺乳动物的核移植实验 中，一般通过电脉冲（或电刺激）（物理方法）将受体细胞激活，使其进行细胞分裂并发育． 利用体细胞进行核移植技术的难度明显高于利用胚胎细胞进行核移植的原因是．
（3）在“试管牛”的培育过程中，要使精子和卵母细胞在体外成功结合，需要对精子进行获能 处理．另外，培养的卵母细胞需要发育至减数分裂第二次分裂中期，该时期在显微镜下可观察到次 级卵母细胞和第一极体．
（4）要使获得的转基因牛分泌的乳汁中含有人干扰素，所构建的基因表达载体必须包括：某种牛乳 腺分泌蛋白基因及其人干扰素基因（或目的基因）、启动子、终止子、标记基因和复制原点等． 目前常用的措施是将该基因表达载体导入牛的受精卵（填“受精卵”或“乳腺细胞”），导 入方法是显微注射法．
（5）将（4）获得的受精卵通过胚胎移植技术最终获得符合要求的个体，移植中“受体“是 指桑椹胚或囊胚；“符合要求的个体“指能分泌含人胰岛素牛奶的母牛．

Answer 1

分析 1、基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．
2、受精前的准备阶段
（1）准备阶段1-精子获能．刚刚排出的精子，不能立即与卵子受精，必须在雌性动物生殖道发生相应的生理变化后，才能获得受精能力．
（2）准备阶段2-卵子的准备，动物排出的可能是初级卵母细胞也可能是次级卵母细胞，都要在输卵管内进一步成熟，达到减数第二次分裂中期时，才具备与精子受精的能力．

解答 解：（1）基因组文库含有某种生物的全部基因；cDNA文库中只含有该种生物的部分基因．
（2）在哺乳动物的核移植实验中，一般通过电脉冲（或电刺激）将受体细胞激活，使其进行细胞分裂并发育；当胚胎发育到桑葚胚或囊胚阶段时，将胚胎植入另一雌性（代孕）动物体内．由于体细胞分化程度高，不容易恢复全能性，因此利用体细胞进行核移植技术的难度明显高于利用胚胎细胞进行核移植．
（3）体外受精时，需要对精子进行获能处理．另外，培养的卵母细胞需要发育至MⅡ中期（减数分裂第二次分裂中期）．在显微镜下可观察到次 级卵母细胞和第一极体．
（4）基因表达载体必须包括：某种牛乳腺分泌蛋白基因及其启动子、人干扰素基因（或目的基因）、终止子、标记基因和复制原点等．培育转基因动物时，常以受精卵为受体细胞，且将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法．
（5）进行胚胎移植时，应选择发育良好、形态正常的桑椹胚或囊胚．科学家用基因工程的技术获取乳腺发生器的生物，即能分泌含人胰岛素牛奶的母牛．
故答案为：
（1）部分
（2）电脉冲（或电刺激）    桑葚胚或囊胚       由于体细胞分化程度高，不容易恢复全能性
（3）获能   第一极体
（4）复制原点        受精卵     显微注射法
（5）桑椹胚或囊胚     能分泌含人胰岛素牛奶的母牛

点评 本题考查基因工程、细胞工程和胚胎工程的相关知识，要求考生识记核移植的具体过程；胚胎移植的基本程序；识记基因工程的具体操作步骤，掌握各步骤中的细节，能结合所学的知识准确答题．