Question

1．“口嚼酒”因日本著名动画电影导演新海诚的新作《你的名字》而引起人们的关注．世界上有些地方很就有口嚼酒的记载．请回答下列相关问题：
（1）口嚼酒的做法是：首先需要将米煮熟，然后放入口中咀嚼-段时间，直至米粒变为糊状，再将其吐入特制容器中，令其发酵，经过几天便成为甜酸味的酒．上述的制作过程中，“咀嚼”可能具有两个作用，分别是增大酶与米饭的接触面积，有利于发酵和使唾液淀粉酶将米饭中的淀粉分解成麦芽糖．参与口嚼酒形成初期的微生物主要是来自空气中的酵母菌，末期形成酸味，可能是因为密封不严，产生了醋酸等物质．
（2）口嚼酒是一种自酿酒，不仅品质不高，而且卫生条件难以把握，会有杂菌滋生的危险．某生物兴趣小组想探究口嚼酒制作过程中会滋生哪些微生物，进行了进一步的实验，实验步骤如下：
①制作口嚼酒．
②制作培养基：计算→称量→溶化→灭菌（或高压蒸汽灭菌）→倒平板．
③接种：每天同一时间将口嚼酒液体摇匀后按照图1和图2的方法进行操作，该方法是稀释涂布平板法．并在每天接种的培养皿上注明培养日期，最后将所有培养基放在相同且适宜的环境下培养．
④经过一段适宜时间后，观察不同培养基上的菌落数和菌落的形态，并进行品种鉴定．图3是三个不同时间获得的培养基，其时间先后为B、C、A（填字母）．
上述实验在时间上形成前后对照，但是还需要设置一个空白对照，目的是检验培养基灭菌是否彻底．
（3）兴趣小组成员在实验后期看到培养基上长满了许多杂菌菌落，若他们采用图4的方法对杂菌中的母的菌进行纯化，则在5（填数字）区最可能获得纯净的母的菌．

Answer 1

分析 1、参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型．果酒制作的原理：
（1）在有氧条件下，反应式如下：C₆H₁₂O₆+6H₂O+6O₂$\stackrel{酶}{→}$6CO₂+12H₂O+能量；             
（2）在无氧条件下，反应式如下：C₆H₁₂O₆$\stackrel{酶}{→}$2CO₂+2C₂H₅OH+能量．
2、参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型．果醋制作的原理：
当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸．
当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸．
3、微生物常见的接种的方法
①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养．在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落．
②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落．

解答 解：（1）口腔中唾液淀粉酶，因此“咀嚼”可能具有两个作用，使唾液淀粉酶将米饭中的淀粉分解成麦芽糖，同时通过咀嚼可以增大酶与米饭的接触面积，有利于发酵．酿酒是利用酵母菌无氧呼吸产生酒精，该酵母菌主要是来自空气，末期形成酸味，可能是因为密封不严，混入了醋酸菌，导致产生了醋酸等物质．
（2）实验目的为探究口嚼酒制作过程中会滋生哪些微生物：
①制作口嚼酒．
②制作培养基：计算→称量→溶化→灭菌（或高压蒸汽灭菌）→倒平板．
③接种：图1和图2采用的是稀释涂布平板法．
④培养时间越长，菌落数越多，图3是三个不同时间获得的培养基的时间先后为B、C、A．
上述实验在时间上形成前后对照，但是还需要设置一个空白对照，目的是检验培养基灭菌是否彻底．
（3）平板划线法中划线次数越多，菌落数越少，因此对杂菌中的母的菌进行纯化，在5区最可能获得纯净的母的菌．
故答案为：
（1）增大酶与米饭的接触面积，有利于发酵     使唾液淀粉酶将米饭中的淀粉分解成麦芽糖      酵母菌         醋酸
（2）②灭菌（或高压蒸汽灭菌）     ③稀释涂布平板法     ④B、C、A       检验培养基灭菌是否彻底
（3）5

点评 本题以“口嚼酒”为题材，考查了微生物的分离与培养以及果酒、果醋的制作的有关知识，要求考生识记参与果酒和果醋制作的微生物及其代谢类型，掌握微生物分离与纯化的方法以及灭菌的措施，能结合所需的知识准确答题，属于考纲识记和理解层次的考查．