Question

【题目】请回答与“固定化酶”实验有关的问题：

(1)—淀粉酶可以通过培养枯草杆菌来生产，_______是筛选高表达量菌株的最简便方法之一。筛选出的菌株在发酵生产之前还需利用__________培养基进行扩大培养。

(2)利用物理或化学的方法将—淀粉酶固定后，成为_______且又有酶活性的制剂。若用吸附法固定时，在装柱后需要用_________缓慢冲洗，直至流出液不使淀粉-碘混合液发生___________为止。

(3)将淀粉溶液以一定流速从反应柱上端滴入，再在下端接取少量流出液进行KI-I2颜色测试，结果不呈现红色。对此现象的解释错误的是___________

A．反应柱中没有—淀粉酶被固定

B．流速过快淀粉未被水解

C．接取的流出液是蒸馏水

D．流速过慢淀粉被水解成葡萄糖

Answer 1

【答案】 单菌落分离 液体 不溶于水 10倍体积蒸馏水 褪色 D

【解析】试题分析：固定化酶是指用物理学或化学的方法将酶与固相载体结合在一起形成的仍具有酶活性的酶复合物。在催化反应中，它以固相状态作用于底物，反应完成后，容易与水溶性反应物和产物分离，可被反复使用。

（1）单菌落的分离是筛选高表达菌株的最简便方法之一；筛选出的菌株在发酵生产之前还需利用液体培养基进行扩大培养。

（2）—淀粉酶在水溶液中很不稳定，且不利于工业化使用，常用固定化技术使之成为不溶性于水而又有酶活性的制剂。若用吸附法固定时，在装柱后需要用蒸馏水缓慢冲洗，所用的蒸馏水体积为装填体积的10倍，直至流出液不使淀粉-碘混合液发生褪色为止。

（3）根据题干信息分析，将淀粉溶液以一定流速从反应柱上端滴入，再在下端接取少量流出液进行KI-I2颜色测试，结果不呈现红色，说明仍然有淀粉存在，可能是由于反应柱中没有—淀粉酶被固定，导致淀粉没有被水解，A正确；也可能是流速过快，导致淀粉未被水解，B正确；也可能接取的流出液是蒸馏水，C正确；淀粉溶液经过α‐淀粉酶后的水解产物是糊精，不是葡萄糖，D错误。