Question

【题目】酵母菌与人类的关系密切，是一种单细胞真菌，在有氧和无氧环境下都能生存，属于兼性厌氧菌，是工业上最重要，应用最广泛的一类微生物，在酿造、食品、医药工业等方面占有重要地位。

（1）在葡萄酒的自然发酵过程中，起主要作用的是附着在葡萄皮上的野生酵母菌。酒精发酵时，一般将温度控制在________；在________________的发酵液中，酵母菌可以生长繁殖，而绝大多数其他微生物无法适应这一环境而受到抑制。

（2）野生酵母菌制酒效率低，为了筛选出高产酒精的酵母菌株，某生物兴趣小组设计了实验方案（略），请回答有关问题：

①培养基的配制：常用马铃薯葡萄糖培养基，培养基中需添加了青霉素，其目的是______________________；培养基灭菌前要将pH调至________。

②酵母菌的液体培养与计数：对培养液中的酵母菌逐个计数是非常困难的，常采用________的方法；发酵过程中检测酵母菌数量可采用________法或稀释涂布平板法计数。

③酵母菌的分离纯化：分离纯化的方法很多，除平板划线法外，________也是一种常用的接种方法，这一方法常用来统计样品中活菌的数目，因为________________________。

（3）胡萝卜素是一种常用的食用色素，可从产胡萝卜素的酵母菌菌体中提取获得，流程如下：

萃取的效率主要取决于________________，同时还受到原料颗粒的大小、紧密程度、含水量、萃取的温度和时间等条件的影响；将提取的胡萝卜素样品通过________进行鉴定。

Answer 1

【答案】18~25℃ 缺氧、呈酸性 抑制细菌（放线菌）生长 酸性 抽样检测 显微镜直接计数 稀释涂布平板法 当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌 萃取剂的选择和使用量 纸层析

【解析】

酵母菌是兼性厌氧微生物，在有氧条件下进行有氧呼吸大量繁殖，在无氧条件下能进行酒精发酵，20℃左右最适合酵母菌繁殖。

（1）温度是酵母菌生长和发酵的重要条件，酒精发酵时，一般将温度控制在18～25℃；在缺氧、呈酸性的发酵液中，酵母菌可以生长繁殖，而绝大多数其他微生物无法适应这一环境而受到抑制。

（2）①青霉素是广谱性抗生素，能有效杀死细菌和放线菌，可选择性培养真菌；

②对培养液中的酵母菌逐个计数是非常困难的，常采用抽样检测的方法；发酵过程中检测酵母菌的数量可采用显微镜直接计数法或稀释涂布平板法计数；

③稀释涂布平板法和平板划线法是常用的接种方法，这两种方法都可将聚集的菌种逐步分散到培养基的表面，最终得到由一个细胞繁殖而来的菌落，要计数时应用稀释涂布平板法。

（3）萃取的效率主要取决于萃取剂的选择和使用量，同时还受到原料颗粒的大小、紧密程度、含水量、萃取的温度和时间等条件的影响；将提取的胡萝卜素粗品通过纸层析进行鉴定。