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    在对蛋白质的生产研究中，需要从复杂的细胞混合物中提取、分离高纯度的蛋白质。下图是利用凝胶色谱法分离血红蛋白的示意图，请回答与血红蛋白的提取和分离的有关问题：

    (1)血红蛋白提取和分离的程序可分为四大步，分别是：样品处理、粗分离、纯化和纯度鉴定。首先通过洗涤红细胞、________________、离心等操作收集到血红蛋白溶液，即样品的处理；再经过________去除分子量较小的杂质，即样品的粗分离；然后通过____________法将相对分子质量大的杂质蛋白除去，即样品的纯化；最后经__________________进行纯度鉴定。

    (2)上图显示相对分子质量不同的蛋白质通过凝胶色谱法分离时，试管中收集到的液体最先出现的是__________________，原因是___________________________________。

    (1)血红蛋白的释放(1分)　透析(1分)　凝胶色谱(1分)　聚丙烯酰胺凝胶电泳(1分)

    (2)相对分子量较大的蛋白质(1分)　蛋白质无法进入凝胶内部的通道，只能在凝胶外部移动，因而路程短、移动速度快(2分)

     

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    科目：高中生物 来源：佛山市2007年普通高校招生第二次模拟考试生物试题 题型：071

    圆褐固氮菌是自生固氮菌，为经济有效地提高农作物产量，人们一直在努力研究、寻找固氮基因。对基因的研究常常因研究样品中DNA含量太低而难以进行，PCR技术有效地解决了这个问题。如今对基因的深入研究使人类跨入了蛋白组研究时代，从复杂的细胞混合物中提取、分离高纯度的蛋白质是该研究要做的基本工作之一。

    （1）某同学在做微生物实验时，不小心把圆褐固氮菌样品和酵母菌样品混在一起，已知青霉素会影响固氮菌的生长繁殖，但不影响真菌的生长繁殖。请填空完成分离这两种菌的主要实验步骤：

    ①分别配置________的培养基和________的培养基，分别分成两份，依次标上A、a、B、b备用；

    ②分别向A、B培养基接种________；

    ③把接种后的培养基放在恒温箱中3d－4d；

    ④从A、B培养基上生长的________中挑取生长良好的菌株，分别接种到________中；

    ⑤________。

    （2）用基因工程技术从经过分离、提纯的圆褐固氮菌中获取固氮基因，然后进行PCR扩增。下列表1和表2分别表示用PCR扩增固氮基因的反应体系及反应条件。

    ①从上表中可得出，PCR技术与DNA复制相比较，主要区别之一是________。

    此外，从反应条件看，所使用的DNA聚合酶应具有________的特点。每次循环都需要2种引物的主要原因是________。

    ②下图为第1轮循环产生的产物。请绘出以a链和b链为模板经PCR扩增的产物。

    （3）在对固氮基因产物的生产研究中，需要从复杂的细胞混合物中提取、分离高纯度的蛋白质。下图表示蛋白质提取和分离实验涉及的相关原理。

    ①图甲表示相对分子质量不同的蛋白质通过凝胶色谱法分离的过程。试管中收集到的液体最先出现的是相对分子质量较大的蛋白质，原因是________。

    ②图乙所示实验模拟电泳现象，U型管左侧的颜色逐渐变深，原因是________。

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    科目：高中生物 来源：2013-2014学年江西吉安一中高三上期期中考试生物卷（解析版） 题型：综合题

    （13分）请回答有关下图的问题：

    （1）图甲中①-⑤所示的生物工程为蛋白质工程。该工程是指以_____作为基础，通过对蛋白质的修饰或合成，对现有的蛋白质进行改造，或制造出一种新的蛋白质，以满足人类生产生活的需求。

    （2）图甲中序号④所示过程叫做______，该过程遵循的碱基互补配对原则不同于翻译过程的是____________（请将模板碱基写在前）。

    （3）如图乙，一个基因表达载体的组成，除了目的基因外，在基因尾端还必须有[2]______；图中[3]__________的作用是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来

    （4）若预期蛋白质欲通过乳腺生物反应器生产，则构建基因表达载体时，图乙中序号[1]代表的是乳腺蛋白基因的_______；且在图甲中⑨过程之前，要对精子进行筛选，保留含性染色体_______的精子。

    （5）为获得较多的受精卵进行研究，图甲中⑥过程一般用激素对供体做_____处理；为提高培育成功率，进行⑩过程之前，要对供、受体动物做________处理。若图甲中的卵母细胞来自从屠宰场收集的卵巢，则其在⑧之前需进行体外培养到______期方能受精。

    （6）用_________技术处理发育到_______期或囊胚期的早期胚胎，可获得同卵双胎或多胎。若是对囊胚进行处理，要注意将________均等分割。

     

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    科目：高中生物 来源：2013届辽宁盘锦第二高级中学高二下学期期中考试生物试卷（解析版） 题型：综合题

    （17分）植物生命活动调节的基本方式是激素调节。下面是有关植物激素的知识及实验研究，请根据有关信息分别回答下列问题：

    （1）植物激素对植物的生长发育产生显著调节作用，植物的生长发育是由多种激素相互协调、共同调节的。

    下表是植物不同部位各种激素的相对浓度，请分析回答：

    部位

    激素的相对浓度

    生长素

    赤霉素

    细胞分裂素

    脱落酸

    茎尖

    ＋＋＋

    ＋＋＋

    ＋＋＋

    —

    幼叶

    ＋＋＋

    ＋＋＋

    —

    —

    伸长茎

    ＋＋

    ＋＋

    —

    —

    侧  芽

    ＋

    ＋

    —

    —

    成熟叶

    ＋

    ＋

    —

    ＋＋＋

    根

    ＋

    ＋

    —

    —

    根  尖

    ＋＋

    —

    —

    —

    ＋＋＋表示含量高；＋＋表示含量中等；＋表示含量低；—表示无

     

    ①目前公认的植物激素共有五大类，除上表中的四大类外，植物体内还有一类物质也属于植物激素，该激素的主要作用是                                                  。

    ②生长素的化学本质是                   。在果实的细胞分裂和细胞伸长时期生长素浓度较高，其原因是                                                           。

    ③在果实成熟时，果实中含量升高的激素有                             。

    ④比较茎尖和伸长茎中各种激素的含量，从细胞水平上分析植物的生长，说明生长素和赤霉素主要通过促进            ，从而促进生长；细胞分裂素主要通过促进            ，而促进生长。

    （2）分析上表可知，成熟叶中含有较多的脱落酸而不含细胞分裂素。科学家通过进一步分析研究可知：脱落酸能抑制核酸、蛋白质的合成，促使叶片衰老。而细胞分裂素则抑制叶绿素、核酸和蛋白质的降解，抑制叶片衰老。所以在生产中可利用细胞分裂素作保鲜剂。

    请你设计一个实验证明“细胞分裂素有延缓叶片衰老的作用”。

    ①实验原理：叶绿素逐渐丧失而失去绿色的叶片衰老最明显的特点，离体叶片很快就会出现衰老的特点，因此，可通过                                                    来证明。

    ②实验步骤：

    第一步：选取                              叶片随机分成两组，分别标记为甲组、乙组。

    第二步：在甲组叶片的局部位置涂上              ，乙组叶片的相同位置涂等量的蒸馏水。

    第三步：                                                                        。

    ③实验结果预测：甲组叶片失绿变黄所需的时间比乙组长。

    ④实验结论：                                                               

     

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    科目：高中生物 来源： 题型：阅读理解

    圆褐固氮菌是自生固氮菌，为经济有效地提高农作物产量，人们一直在努力研究、寻找固氮基因。对基因的研究常常因研究样品中DNA含量太低而难以进行，PCR技术有效地解决了这个问题。如今对基因的深入研究使人类跨入了蛋白组研究时代，从复杂的细胞混合物中提取、分离高纯度的蛋白质是该研究要做的基本工作之一。

    （1）某同学在做微生物实验时，不小心把圆褐固氮菌样品和酵母菌样品混在一起，已知青霉素会影响固氮菌的生长繁殖，但不影响真菌的生长繁殖。请填空完成分离这两种菌的主要实验步骤：

    ①分别配置                的培养基和             的培养基，分别分成两份，依次标上A、a、B、b备用；

    ②分别向A、B培养基接种             ；

    ③把接种后的培养基放在恒温箱中3d—4d；

    ④从A、B培养基上生长的       中挑取生长良好的菌株，分别接种到        中；

    ⑤                                  。

    （2）用基因工程技术从经过分离、提纯的圆褐固氮菌中获取固氮基因，然后进行PCR扩增。下列表1和表2分别表示用PCR扩增固氮基因的反应体系及反应条件。

    PCR反应体系

    50ul

    缓冲液

    5ul

    脱氧核苷酸

    1ul

    引物A      

    0.5ul

    引物B      

    0.5ul

    DNA聚合酶   

    0.5U

    模板DNA     

    1-2ul

    加去离子水补足至50 ul

    反应条件

    温度

    时间

    变  性

    95℃

    30s

    复  性

    55℃

    30s

    延  伸

    72℃

    1min

    30个循环后

    适宜

    5-10min

    保  温

    4℃

    2h

    ①从上表中可得出，PCR技术与DNA复制相比较，主要区别之一是               。

    此外，从反应条件看，所使用的DNA聚合酶应具有__________的特点。每次循环都需要2种引物的主要原因是_______________           ________________。

    ②下图为第1轮循环产生的产物。请绘出以a链和b链为模板经PCR扩增的产物。

    （3）在对固氮基因产物的生产研究中，需要从复杂的细胞混合物中提取、分离高纯度的蛋白质。下图表示蛋白质提取和分离实验涉及的相关原理。

    ①图甲表示相对分子质量不同的蛋白质通过凝胶色谱法分离的过程。试管中收集到的液体最先出现的是相对分子质量较大的蛋白质，原因是                            。

    ②图乙所示实验模拟电泳现象，U型管左侧的颜色逐渐变深，原因是            。

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