Question

14．研究人员测试新抗生素对某种链球菌的杀菌效果，这种链球菌能引起人的咽喉感染，将此链球菌分别接种在三个培养皿中，在2号培养皿中放入一片浸过新型抗生素的圆片，3号作为对照，三只培养皿如图1所示．

（1）请对本实验做出假设：这种新型抗生素对细菌生长无影响；或这种新型抗生素对细菌的生长有抑制作用．
（2）“细菌喜荤，霉菌喜素”，所以该细菌培养基一般用蛋白胨和酵母提取物来配制，制备培养基的操作顺序是bedca．（用下列字母排序）
a．倒置培养基　b．计算和称量　c．灭菌　d．调pH　e．溶解和熔化
（3）为能彻底消灭培养基中的其他微生物，科学家研究出间隙灭菌法．其程序是：第一天，将培养基在100℃下维持30min，然后在35～37℃下放置24h；第二天、第三天重复第一天的操作．请分析：
①培养基在100℃下维持30min的目的是杀死活的微生物；
②在35～37℃下放置24h后再加热的目的是杀死24小时中由细菌芽孢萌发而生长的微生物；
③怎样证明间隙灭菌法的效果？将培养基在37℃下放置3～5天，如果无微生物生长，则证明培养基已达到灭菌效果．
（4）对照组培养皿3中的圆片应作怎样的处理？将圆片在不添加任何抗生素的无菌水中浸泡一段时间．
（5）利用平板划线或稀释涂布平板法对培养皿1进行该链球菌接种，把聚集的菌种逐步分散到培养基的表面．待长出菌落后，利用无菌绒布将培养皿1中的菌落转移到培养皿2和3中，转移过程要注意不能转动绒布．
（6）三只培养皿都放在37℃的温度条件下培养24h，其中1号培养皿的变化结果如图2所示，在2号培养皿中画出假设的变化结果．．

Answer 1

分析 1、本实验的目的是测试新抗生素对某种链球菌的杀菌效果，自变量是抗生素的有无，因变量是细菌的生长状况，由此可以确定实验假设．
2、制备培养基的操作顺序一般为先计算和称量各种物质，再进行溶解和溶化成溶液，然后再调pH和灭菌，最后倒置培养基．
3、无论哪一种灭菌方法，最终目标是杀灭或清除环境中一切微生物（包括芽孢和孢子）．
4、在实验过程中始终要遵循对照原则、单一变量原则、等量原则和控制无关变量等．

解答 解：（1）题干中描述本题的目的是测试新抗生素对某种链球菌的杀菌效果，所以可以假设“新型抗生素能够抑制细菌的生长”，当然也可以假设“新型抗生素对细菌的生长无影响”．
（2）“细菌喜荤，霉菌喜素”，所以该细菌培养基一般用蛋白胨和酵母提取物来配制．配制培养基时，先计算和称量各种物质，再进行溶解和溶化成溶液，然后再调pH和灭菌，最后倒置培养基．
（3）灭菌的最终目标是杀灭或清除环境中一切微生物（包括芽孢和孢子）．
（4）3号作为对照不需要加任何抗生素，将圆片在不添加任何抗生素的无菌水中浸泡一段时间．
（5）接种的方法有平板划线法或稀释涂布平板法．采用印章法转移菌种时，绒布不能进行转动，才能确保细菌位置不变．
（6）有抗生素的周围部位没有菌落的形成，其他部位仍有菌落．结果如图：

故答案为：
（1）这种新型抗生素对细菌生长无影响；或这种新型抗生素对细菌的生长有抑制作用
（2）蛋白胨和酵母提取物　bedca
（3）①杀死活的微生物　②杀死24小时中由细菌芽孢萌发而生长的微生物　③将培养基在37℃下放置3～5天，如果无微生物生长，则证明培养基已达到灭菌效果
（4）将圆片在不添加任何抗生素的无菌水中浸泡一段时间
（5）平板划线或稀释涂布平板　不能转动绒布
（6）

点评 本题主要考查微生物的培养实验，原则加强学生微生物培养的实际操作过程和对实验的分析能力．