Question

【题目】若要利用某目的基因（见图甲）和P1噬菌体载体（见图乙）构建重组DNA（见图丙），限制性核酸内切酶的酶切位点分别是BglⅡ（A↓GATCT）、EcoRⅠ（G↓AATTC）和Sau3AⅠ（↓GATC）。下列分析合理的是（ ）

A．用EcoRⅠ切割含目的基因的DNA和P1噬菌体载体

B．用BglⅡ和EcoRⅠ切割含目的基因的DNA和P1噬菌体载体

C．用BglⅡ和Sau3AⅠ切割含目的基因DNA和P1噬菌体载体

D．用EcoRⅠ和Sau3AⅠ切割含目的基因DNA和P1噬菌体载体

Answer 1

【答案】D

【解析】用EcoRⅠ切割含目的基因的DNA和P1噬菌体载体，产生相同的黏性末端，用DNA连接酶连接时可能会发生反向连接，A错误；用BglⅡ和EcoRⅠ切割含目的基因的DNA，会产生一断含目的基因的DNA片段，其两端的黏性末端相同，但与用BglⅡ和EcoRⅠ切割P1噬菌体载体产生的两个黏性末端之一不同，不能构建重组DNA,B错误；用BglⅡ和Sau3AⅠ切割含目的基因的DNA和P1噬菌体载体，也能产生相同的黏性末端，可能会发生反向连接，C错误；只有用EcoRⅠ和Sau3AⅠ切割含目的基因的DNA和P1噬菌体载体，产生不同的黏性末端，防止发生反向连接，这样目的基因插入载体后，RNA聚合酶的移动方向肯定与图丙相同，D正确。