【题目】基因工程的相关技术可用于病毒检测，也可用于制备疫苗。利用荧光PCR技术检测是否感染某种RNA病毒时，基本操作流程为：提取病毒的RNA→荧光PCR扩增反转录DNA→荧光检测。请回答下列问题：
（1）分离病毒的RNA通常在冰浴条件下进行，目的是抑制________________的活性，防止病毒的RNA降解。荧光PCR反应体系中需要加入的酶和原料是________________。为保证反应体系只扩增病毒特异性核酸序列，应先根据病毒的特异性核酸序列设计________________。
（2）荧光染料能掺入DNA双链中发出荧光，在游离状态下不发出荧光。若检测到荧光量达到某个临界值，则代表阳性，说明________________________________。若检测出现“假阴性”现象，原因可能是________________________________。
（3）某病毒的E蛋白和P蛋白会引起机体产生特异性免疫反应。构建重组活病毒载体疫苗时，获取某病毒的________________插入腺病毒的基因组中。通过重组腺病毒感染动物可使其获得免疫力，原因是________________________________________________。
【答案】RNA酶 反转录酶、Taq酶和4种脱氧核苷酸 2种引物 样本中含有病毒的RNA 病毒的RNA在提取过程中发生降解 E基因和P基因 重组腺病毒在动物体内表达E蛋白和P蛋白，刺激动物产生特异性抗体和记忆细胞
【解析】
基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样.将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术.个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。
（1）RNA酶可以降解RNA，冰浴条件可以抑制RNA酶的活性防止RNA降解。荧光PCR可以利用RNA扩增反转录DNA，需要的酶有反转录酶、Taq酶，原料是dNTP（dATP、dGTP dCTP、dTTP），样液中可能含病毒的RNA，细胞自身的各种RNA等，为了保证反应体系只扩增病毒特异性核酸序列，应先根据病毒的特异性核酸序列设计2种引物，确保只有病毒的特异性RNA可以扩增，其他RNA不能扩增。
（2）荧光染料能掺入DNA双链中发出荧光，在游离状态下不发出荧光。若检测到荧光量达到某个临界值，说明病毒的RNA在荧光PCR仪中扩增，待测样本中含有病毒的RNA，“假阴性”说明样本中含有病毒的RNA，但是未扩增到能检测出的临界值，可能原因是病毒的RNA在提取过程中发生降解，待测样本中的病毒（核酸）量少。
（3）某病毒的E蛋白和P蛋白可引发机体特异性免疫反应，可以将获取的病毒的E基因和P基因插入腺病毒的基因组中，重组腺病毒在动物体内表达E蛋白和P蛋白，刺激动物产生特异性抗体和记忆细胞，使动物获得免疫力。
快捷英语周周练系列答案科目：高中生物 来源： 题型：
【题目】下列属于原核生物的一组是
①颤藻 ②酵母菌 ③蓝细菌 ④念珠藻 ⑤变形虫 ⑥蓝球藻 ⑦蓝藻 ⑧草履虫
A.①④⑦B.①②⑥⑧C.①③④⑥⑦D.①②⑦⑧
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【题目】人的糖蛋白必须经内质网和高尔基体进一步加工合成。通过转基因技术，可以使人的糖蛋白基因得以表达的受体细胞是
A. 酵母菌B. 大肠杆菌C. T4噬菌体D. 肺炎球菌
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科目：高中生物 来源： 题型：
【题目】用于核移植的供体细胞一般都选用 （ ）
A. 受精卵
B. 传代10代以内的细胞
C. 传代10～50代以内的细胞
D. 处于减数第二次分裂中期的次级卵母细胞
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科目：高中生物 来源： 题型：
【题目】下列表述正确的是
A.DNA和RNA都能携带遗传信息
B.所有生物的DNA都具有相同的脱氧核苷酸排列顺序
C.组成DNA的脱氧核苷酸只有4种，所以DNA的种类较少
D.DNA只分布在细胞核中，RNA只分布在细胞质中
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科目：高中生物 来源： 题型：
【题目】下表是有关酶专一性的探究实验，“—”表示不加。下列叙述正确的是
试管 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 |
本尼迪特试剂 | 2 mL | 2 mL | 2 mL | 2 mL | 2 mL | 2 mL |
1%淀粉溶液 | 3 mL | — | 3 mL | — | 3 mL | — |
2%蔗糖溶液 | — | 3 mL | — | 3 mL | — | 3 mL |
新鲜唾液 | — | — | 1 mL | 1 mL | — | — |
蔗糖酶溶液 | — | — | — | — | 1 mL | 1 mL |
实验结果 |
A.该实验的自变量是酶的种类
B.本实验仅以试管 1、2 为对照
C.本实验不能用碘－碘化钾溶液代替本尼迪特试剂
D.若 5 号试管中呈现轻度阳性反应，说明蔗糖酶也可少量催化淀粉分解
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【题目】保护生物多样性是实现人类社会可持续发展的基础。下列对生物多样性的理解正确的是（ ）
A. 生物多样性的丰富程度与自然选择无关
B. 群落演替过程中的生物多样性逐渐降低
C. 物种多样性比较高的生态系统相对稳定
D. 遗传多样性较低的种群适应环境能力强
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科目：高中生物 来源： 题型：
【题目】下列关于下丘脑与垂体及其分泌激素的叙述，错误的是（ ）
A.性激素含量减少会使促性腺激素释放激素和促性腺激素分泌增多
B.抗利尿激素由下丘脑产生，垂体释放
C.促甲状腺激素释放激素通过血液运输直接作用于甲状腺
D.下丘脑内有神经内分泌细胞，这种细胞既能传导兴奋也能分泌激素
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科目：高中生物 来源： 题型：
【题目】（地理——选修6：环境保护）
1999年之前，我们有记录的睑虎属物种仅一种。但自1999年之后，我国广西、贵州等地陆续发现9种睑虎属物种。因其在1999年后才被大量发现，所以睑虎并不在1989年开始实施的《中华人民共和国野生动物保护法》保护名录当中。睑虎多栖息在热带、亚热带山区的石灰岩地区或花岗岩地带，活动范围很狭窄。因其独特的外形、鲜艳的斑纹、充满魅力的瞳孔，睑虎在宠物市场广受欢迎。自更多睑虎属物种被发现、并公诸于世开始，我国睑虎数量急剧下降。
指出导致睑虎数量急剧下降的直接原因，并提出保护措施。
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