Question

【题目】【生物——选修3现代生物科技专题】请分析下面一项专利。

申请专利号	03109739．1	时间	2003．04．14
名 称	利用转基因番茄生产胰岛素的方法	公开号	1458161
公开日	2003．11．26	申请（专利权）	林忠平
地 址	北京市北京大学 生命科学学院	发明（设计人）	林忠平、倪挺、 陈溪、胡鸢雷
专 利 摘 要	本发明利用转基因番茄作为生物反应器生产人胰岛素。所用的人胰岛素基因是依据植物偏爱密码子的原则来设计所含的密码子，通过人工合成若干DNA片段，拼接而成，并且在C端加上KDEL的内质网滞留序列。将该基因置于CaMV35S启动子和果实专一性启动子2A12的驱动之下，通过农杆菌介导的方法转入番茄中，在番茄的果实中表达人胰岛素。

（1）此基因工程中，目的基因是 。将人工合成的DNA片段拼接在一起，所必需的工具酶是 。

（2）试分析在C端加上KDEL的内质网滞留序列的原因： 。

（3）农杆菌介导的方法是将目的基因与农杆菌的 结合构建 ；目的基因能否在番茄中稳定遗传的关键是 ；检测受体细胞中是否存在目的基因可采用 技术。

Answer 1

【答案】（15分）（1）人胰岛素基因（2分） 限制（性核酸内切）酶、DNA连接酶（2分）

（2）使胰岛素合成后在植物内质网中保存，以免在细胞内被降解（3分）

（3）质粒（或Ti质粒）（2分） 基因表达载体（2分） 番茄染色体DNA上是否插入了目的基因（2分）

DNA分子杂交（2分）

【解析】

试题分析：（1）由“专利摘要”可知：此基因工程中，目的基因是人胰岛素基因。将人工合成的DNA片段拼接在一起即构建基因表达载体，所必需的工具酶是限制性核酸内切酶、DNA连接酶。

（2）在C端加上KDEL的内质网滞留序列，可使胰岛素合成后在植物内质网中保存，以免在细胞内被降解。

（3）将目的基因导入受体细胞，本题采用的是农杆菌转化法，即将目的基因与农杆菌的质粒（或Ti质粒）结合构建基因表达载体；目的基因能否在番茄中稳定遗传的关键是番茄染色体DNA上是否插入了目的基因；检测受体细胞中是否存在目的基因可采用DNA分子杂交技术。