Question

【题目】从自然菌样筛选较理想的生产菌种的一般步骤是：采集菌样→富集培养→纯种分离→性能测定。

（1）不同微生物的生存环境不同，获得理想微生物的第一步是从适合的环境采集菌样，然后再按一定的方法分离、纯化。培养分解纤维素的细菌样应从____________环境采集。

（2）富集培养指创设仅适合待分离微生物旺盛生长的特定环境条件，同时抑制或阻止其他微生物生长，使其在群落中的数量大大增加，从而分离出所需微生物的培养方法。对纤维素分解菌的富集培养应选择_______________的培养基，此外，在筛选纤维素的分解菌的过程中则是用____________染色法，培养基中出现以纤维素分解菌为中心的_________。

（3）对分离的菌种还要做进一步的鉴定，如在鉴定分解尿素的细菌时，需在培养基中加入________指示剂，若指示剂变________色，说明有目的菌株存在。

（4）从土壤中分离出分解尿素的细菌后，如需计数，在对样品悬液进行梯度稀释时，未经振荡而直接取上层悬液进行梯度稀释，用不同稀释倍数的样液接种到平板上进行培养和计数，统计出的菌落数往往比正确操作统计出的菌落数______（填偏大、偏小或相等）。

（5）在整个微生物的分离和培养中，一定要注意在____________条件下进行，通常将____________的形状、大小、颜色等特征作为鉴定菌种的依据。

（6）制作牛肉膏蛋白胨固体培养基时，应待培养基冷却至50℃左右时，在 ________附近倒平板。等待平板冷却凝固后，将平板________。

（7）DNA的鉴定中，DNA与________试剂混合经水浴加热呈________色。

Answer 1

【答案】富含纤维素 以纤维素为唯一碳源 刚果红 透明圈 酚红 红 偏大 无菌 菌落 酒精灯火焰 倒置 二苯胺 蓝色

【解析】

筛选目的菌株一般是从适合的环境采集菌样，然后再按一定的方法分离、纯化。常用的接种方法是稀释涂布平板法和平板划线法。培养基在配制时，各种成分在溶化后分装前必须进行pH调整，接种前要进行灭菌，保证无菌操作，培养微生物时，应将培养皿倒置。

（1）因为不同的微生物生存的环境不同，所以采集纤维素分解菌应从富含纤维素的环境中采集。

（2）筛选微生物需配制选择培养基，因为纤维素分解菌能分解纤维素，故在培养基中加入纤维素为唯一碳源。在筛选纤维素分解菌时往往采用刚果红染色法，因为刚果红能与培养基中的纤维素形成红色复合物，当纤维素被纤维素酶分解后，刚果红—纤维素的复合物就无法合成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，所以我们就可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。

（3）尿素分解菌能够产生脲酶使尿素分解为氨而使染液pH升高，使得酚红指示剂显红色，所以可以用酚红指示剂鉴定尿素分解菌，证明目的菌株的存在。

（4）尿素分解菌的代谢类型是异样需氧型，尿素分解菌主要集中在培养液的上层，所以未经振荡而直接取上层悬液进行梯度稀释，用不同稀释倍数的样液接种到平板上进行培养和计数，统计出的菌落数往往比正确操作统计出的菌落数偏大。

（5）微生物的分离和培养过程中，一定要注意无菌操作，防止杂菌污染，通常将菌落的形状、大小、颜色等特征作为鉴定菌种的依据。

(6)制作牛肉膏蛋白胨固体培养基时，待培养基冷却至50℃左右时，在酒精灯火焰附近倒平板。待平板冷却凝固约5～10min后，将平板倒过来放置，使皿盖在下，皿底在上。

(7) 在沸水浴的条件下，DNA遇二苯胺会变成蓝色。