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    【题目】白酒发酵过程中，窖池中培养液的pH会降低。为选育适合白酒生产的耐酸性强的酵母菌，研究者进行了相关实验。请回答有关问题：

    （1）酵母菌的代谢类型是________。

    （2）温度和pH是影响酵母菌生长和发酵的重要条件。________℃左右最适合酵母菌繁殖。酵母菌能在pH值为3．0~7．5的范围内生长，最适pH值为4．5~5．0。发酵过程中窖池中培养液的pH会逐渐下降，原因是________________。

    （3）从窖池取含酵母菌的适量培养液分别接种到酸碱度不同的麦芽汁培养基上，发现在pH≤3的环境中，仍可检测到少量耐酸性酵母菌生长，这些菌株是________形成的。

    （4）研究者从pH为2~3的培养液中获得菌种，可通过________法接种到培养基上，进行纯化培养。纯化培养所用培养基常用________法灭菌，灭菌后在________附近倒平板。

    （5）实验获得了三个耐酸性强的酵母菌菌株，特点如下表。

    菌株

    A

    B

    C

    特点

    pH≤3时，生长代谢正常并优于其它常规菌种

    pH≤3时，生长代谢正常，pH4~6时不正常

    pH为2~6时，生长代谢正常并优于其|它常规菌种

    依据菌株特点，研究者认为C菌株更适合作为白酒发酵菌株，作出这一判断的理由是________。

    【答案】异养兼性厌氧型 20 细胞呼吸产生二氧化碳，可形成碳酸；代谢过程中还产生了其他酸性物质 基因突变 平板划线法或稀释涂布平板 高压蒸汽灭菌 酒精灯 该菌对pH耐受范围更大，发酵初期pH近中性，C菌种适合此环境，更易于形成优势菌群；发酵后期pH逐渐降低，C菌种依然能正常生长

    【解析】

    1、葡萄酒与白酒制作的原理是酵母菌无氧呼吸产生酒精和二氧化碳，酵母菌是兼性厌氧微生物，在缺氧条件下进行无氧呼吸，在氧气充足的条件下进行有氧呼吸，酵母菌具有核膜包被的细胞核，属于真核生物，适宜酵母菌生长的温度范围是18～25℃。
    2、常用的微生物接种方法为平板划线法和稀释涂布平板法。

    （1）酵母菌的代谢类型是异养兼性厌氧型。

    （2）适宜酵母菌生长的温度范围是18～25℃。即20℃左右最适合酵母菌繁殖。由于酵母菌细胞呼吸产生二氧化碳，可形成碳酸；以及代谢过程中还产生了其他酸性物质，所以在发酵过程中窖池中培养液的pH会逐渐下降。

    （3）酵母菌生长的最适pH值为4．5~5．0，过酸的PH会导致酵母菌死亡，但在pH≤3的环境中，仍检测到少量耐酸性酵母菌生长，说明这些菌株是基因突变形成的。

    （4）常用的微生物接种方法为平板划线法和稀释涂布平板法。培养基的灭菌方法为高压蒸汽灭菌，培养基灭菌后要在酒精灯附近倒平板，以防止微生物的污染。

    （5）比较表格中的三种菌体的特点可知，C菌对pH耐受范围更大，而酵母菌发酵的初期pH近中性，所以C菌种适合此环境，更易于形成优势菌群；而且发酵后期pH逐渐降低，C菌种依然能正常生长，所以C菌株更适合作为白酒发酵菌株。

    练习册系列答案
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    B.搅拌的作用主要是使菌体破裂，并释放出子代噬菌体

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    C．两个过程中都需要梯度稀释

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    __________计数也是测定微生物数量的常用方法。 实验过程中还需设制空白培养基作为对照，其目的是______________________________。

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