Question

【题目】研究表明，HER2/neu是一种原癌基因，它表达的H蛋白在多种恶性肿瘤特别是乳腺癌细胞中过量表达。抗H蛋白单克隆抗体能抑制过量表达H蛋白的乳腺癌细胞的生长，目前已成为有效的生物治疗手段。

（1）原癌基因的作用是____________________。

（2）H蛋白是一个跨膜蛋白，结构如图所示。制备免疫小鼠用的H蛋白（抗原）时，应构建胞外区基因，转入原核细胞表达并提纯。选择胞外区的原因是_________________。为了扩增出大量胞外区需要用到PCR技术。常规PCR技术一般包括变性、退火、延伸等步骤，退火的目的是________________________。设计引物是PCR技术的关键步骤之一，某同学设计的两组引物如下表所示。_________（填“引物对A”或“引物对B”）设计不合理，并说出不合理的理由：______________________________________。

引物对A	P1 AAGCCGGGCGCGCCCGGAA P2 TTCGGCCCGCGTTATGCGCG
引物对B	S1 GTCCGCTAGTGGCTGTG S2 AGCTGGCGTTTAGCCTCG

（3）制备抗H蛋白单克隆抗体时，需将H蛋白注射到小鼠体内。这样做的目的是_____________________________。制备抗H蛋白单克隆抗体时，需要用到细胞融合技术，该技术的主要优点是_____________________________________。

（4）治疗乳腺癌时，方法之一是单独使用抗H蛋白单克隆抗体，试写出治疗乳腺癌的另一种疗效高、毒副作用小的、不损伤正常细胞的方法：________________。

Answer 1

【答案】调节细胞周期，控制细胞生长和分裂的进程 由于抗体主要存在于细胞外液中．制备获得的抗体作用于该抗原的胞外区 引物与模板发生碱基互补配对 引物对A 引物P1自身碱基互补配对，引物P1和P2部分发生碱基互补配对 使小鼠体内产生相应的B淋巴细胞 突破有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能 将该单克隆抗体与抗癌药物结合构建“生物导弹”，注入体内，杀死癌细胞

【解析】

人和动物细胞的染色体上本来就存在着与癌有关的基因：原癌基因和抑癌基因。环境中的致癌因子会损伤细胞中的DNA分子，使原癌基因和抑癌基因发生突变，导致正常细胞的生长和分裂失控而变成癌细胞。

PCR技术是一种体外迅速扩增DNA片段的技术，能以极少量的DNA为模板，在几小时内复制出上百万份的DNA拷贝。引物是一小段DNA或RNA，它能与DNA母链的一段碱基序列互补配对，作用是使DNA聚合酶能从引物的3’端开始连接脱氧核苷酸。

单克隆抗体的制备过程：对小鼠注射特定的抗原蛋白，免疫小鼠以获得相应B淋巴细胞，利用诱导因子将鼠的骨髓瘤细胞与已免疫的B淋巴细胞融合，用特定选择培养基筛选杂交瘤细胞，再进行克隆化培养和抗体检测获得能产生特定抗体的杂交瘤细胞，体外大规模培养即可提取单克隆抗体。

（1）原癌基因的作用是负责调节细胞周期，控制细胞生长和分裂的进程。

（2）由于抗体主要存在于细胞外液中，制备获得的抗体作用于该抗原的胞外区，因此构建胞外区基因，转入原核细胞表达并提纯，作为抗原注射到小鼠体内。PCR利用了DNA的热变性原理，通过控制温度来控制双链的解聚与结合，其中退火的目的是降低温度使引物与模板发生碱基互补配对。分析表格中两对引物可知，引物对A不合理，因为引物对A中P1自身碱基互补配对，引物P1和P2部分发生碱基互补配对，不利于PCR过程引物与目的基因的结合。

（3）在制备单克隆抗体时，将H蛋白注射到小鼠体内的目的是使小鼠体内产生相应的B淋巴细胞，还需要用到细胞融合技术，细胞融合技术的优点是突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能。

（4）单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高，并可能大量制备的特点，在治疗乳腺癌时，可将该单克隆抗体与抗癌药物结合构建“生物导弹”，注入体内，杀死癌细胞。