Question

【题目】淀粉酶在工业生产上应用最早，迄今仍是用途最广、产量最大的酶制剂产品之一。为了提高淀粉酶的生产水平，首先要从土壤中筛选出产淀粉酶的活性菌株。某研究人员对所取土样进行产淀粉酶的细菌的分离操作（A组）和计数操作（B组），过程如图Ⅰ。图Ⅱ是一种接种方法示意图。请回答下列问题：

（1）步骤③、④所用培养基的成分，最大的区别是______种类不同。

（2）步骤④、⑤所用培养基的成分，最大的区别是固体培养基中添加了______。步骤⑤、⑧接种时需设置未接种培养基做对照，目的是______。

（3）步骤⑦中，将1mL菌液分别稀释10倍和100倍，每种稀释度经过步骤⑧各在3个平板上接种（每个平板的接种量为0.1mL），经适当培养后，2组平板上的菌落数分别为59、57、58和2、7、5。据此可得出每升菌液中的活菌数为______个，据此可推测适宜的土壤稀释倍数为______倍。

（4）图Ⅱ所用的接种方法______（填“能”或“不能”）对活菌进行计数；甲、乙、丙为划线的三个区域，为正确完成整个接种过程，接种环要进行______次灼烧灭菌，其中灭菌目的相同的是第______次。

Answer 1

【答案】碳源 琼脂 检测培养基是否被污染 5.8×106 10 不能 4 第二、三次

【解析】

步骤①所用的小铁铲需采用干热灭菌法进行灭菌处理；步骤②为无菌水制成的菌液；步骤③为扩大培养；步骤④为选择培养；步骤⑤为固体培养基接种；步骤⑦⑧⑨为微生物的分类计数；II为平板划线法。

（1）步骤③为扩大培养，而步骤④为选择培养基，选择培养使用的培养基为选择培养基，因此所用的培养基的成分，最大的区别是碳源种类不同，即选择培养基中需要以淀粉作为唯一碳源。

（2）步骤④为液体培养基，步骤⑤为固体培养基，两者的主要区别是固体培养基中需添加琼脂成分；为检测培养基是否被污染，步骤⑤、⑧接种时需设置未接种培养基做对照；

（3）应选择数目在30-300之间的平板进行计数，故稀释倍数是10的浓度较为合适，每升菌液中的活菌数为（59＋57＋58）/3÷0.1×10×103=5.8×106 个；

（4）图Ⅱ所用的接种方法为平板划线法，该方法不能对活菌进行计数；据图分析，共甲、乙、丙为划线的三个区域，为正确完成整个接种过程，划线前及划线结束都要进行灼烧灭菌，共4次，其中第二、三次均是为了杀灭接种环上的存留的菌种，两次目的相同。