【题目】Ⅱ型干扰素是效应T细胞分泌的一种淋巴因子，可用于治疗病毒感染和癌症。科学家将Ⅱ型干扰素基因与大肠杆菌的DNA分子进行了重组，成功地在大肠杆菌中得以表达。
（1）若用PCR技术扩增Ⅱ型干扰素基因，其前提条件是有一段______，以便根据这一序列合成引物。PCR过程需要经过多次循环，每一个循环包括：加热变形→冷却复性→加热延伸，其中冷却复性的目的是______，加热延伸过程中发生最主要的过程是______。
（2）已知限制酶Ⅰ的识别序列和切点是—G↓GATCC—，限制酶Ⅱ的识别序列和切点—↓GATC—，Ⅱ型干扰素基因结构如图中所示。
①在构建基因表达载体的过程中，用限制酶______切割质粒，用限制酶______切割目的基因。
②将得到的大肠杆菌涂布在一个含有氨苄青霉素的培养基上，得到如图a所示的结果（圆点表示菌落），该结果说明能够生长的大肠杆菌中已导入了______。将灭菌绒布按到培养基a上，使绒布表面沾上菌落，然后将绒布按到含四环素的培养基上培养，得到如图b所示的结果（圆圈表示与图a培养基上对照无菌落的位置）。与图b圆圈相对应的图a中的菌落表现型是______，这些大肠杆菌中导入了______。
【答案】已知核苷酸序列的目的基因 便于引物与互补的DNA链的结合 在7075℃时，热稳定的DNA聚合酶把单个脱氧核苷酸通过磷酸二酯键连接到引物上，如此逐渐延伸形成互补链 Ⅰ Ⅱ 普通质粒或重组质粒 抗氨苄青霉素但不抗四环素 重组质粒
【解析】
1.获得目的基因的方法：①从基因文库中获取②利用PCR技术扩增③人工合成（化学合成）。PCR技术的原理是DNA双链复制。利用PCR技术扩增目的基因的前提条件是：要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根据这一序列合成引物。利用PCR扩增目的基因的过程由高温变性(9095℃)、低温复性(5560℃)、适温延伸(7075℃)三个步骤构成一个循环，在扩增过程中离不开Taq酶(热稳定性DNA聚合酶)的催化。
2.将得到的大肠杆菌B涂布在一个含有氨苄青霉素的培养基上，因质粒上有抗氨苄青霉素基因，且重组质粒上的抗氨苄青霉素基因，也没有被破坏，所以如果大肠杆菌B能够生长，说明已导入了含抗氨苄青霉素基因的普通质粒或重组质粒，反之则没有导入。
3.分析题图：图示表示利用基因工程培育工程菌的过程，图中②表示基因表达载体的构建过程，该过程需要限制酶和DNA连接酶；③表示将目的基因导入大肠杆菌的过程，转化后的大肠杆菌经过检测和筛选获得工程菌。
（1）根据以上分析可知，用PCR技术扩增Ⅱ型干扰素基因，其前提条件是有一段已知核苷酸序列的目的基因，以便根据这一序列合成引物。PCR过程冷却复性(5560℃)的目的是便于引物与互补的DNA链的结合，加热延伸过程中发生最主要的过程是在7075℃时，热稳定的DNA聚合酶把单个脱氧核苷酸通过磷酸二酯键连接到引物上，如此逐渐延伸形成互补链，进而使目的基因加倍。
（2）①在构建基因表达载体时，需用限制酶对目的基因和质粒进行切割以形成相同的黏性末端。质粒如果用限制酶Ⅱ来切割的话，将会在质粒在出现两个切口且抗生素抗性基因全被破坏，故质粒只能用限制酶Ⅰ切割（破坏四环素抗性而保留氨苄青霉素抗性，即将来形成的重组质粒能在含氨苄青霉素的培养基中生存，而在含四环素的培养基中不能生存）；目的基因两端都出现黏性末端时才能和质粒发生重组，故目的基因只有用限制酶Ⅱ切割时，才会在两端都出现黏性末端。
②因本题质粒上有2个标记基因，但抗四环素基因被插入的基因破坏掉，因此剩下的是抗氨苄青霉素抗性基因，如果在含氨苄青霉素的培养基上能生长，说明已经导入了重组质粒或普通质粒，因为普通质粒和重组质粒都含有抗氨苄青霉素的基因。与图2中b空圈相对应的图2的a中的菌落表现型是抗氨苄青霉素但不抗四环素，说明这些细菌中导入了重组质粒。
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【题目】下图分别表示两个自变量对光合速率的影响情况。除各图中所示因素外，其他因素均控制在最适范围。下列分析正确的是
A.甲图中a点的限制因素可能是叶绿体中色素的含量
B.乙图中c点与d点相比，相同时间内叶肉细胞中C消耗C3量多
C.图中M、N、P点的限制因素分别是CO2浓度、温度和光照强度
D.丙图中，随着温度的升高，曲线走势将稳定不变
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【题目】小球藻（一种单细胞的绿藻）是中学实验中经常用来研究光合作用的优良材料，美国科学家鲁宾和卡门、卡尔文都是利用小球藻取得重大的科研成果。如图甲是某校研究性小组利用小球藻研究光合作用的装置，图乙是在其他条件适宜的情况下测定的O2吸收量．请结合有关知识回答问题：
（1）为了探究光合作用释放的氧气到底是来自二氧化碳还是水？美国科学家鲁宾和卡门利用同位素标记法进行了探究。他们用氧的同位素18O______，然后进行两组实验：第一组向小球藻提供______；第二组向等量小球藻提供______。在光照、温度等其他条件都相同且适宜的情况下，他们分析了两组实验释放的氧气，结果有力证明光合作用释放的氧气来自水。
（2）与图乙曲线形成有关的细胞器是______。
（3）若用图甲装置探究光照强度对光合作用的影响，结合题中图乙信息写出实验设计思路（提示：实验室提供多套图甲装置，只要写出一种思路即可）：______。
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【题目】回答下列I、II两小题。
I．抗虫的转基因植物，含有Bt蛋白，也叫毒蛋白，Bt蛋白本身其实没有任何毒性，但是鳞翅目幼虫的肠道壁上有一种特别的蛋白，喜欢与Bt蛋白结合，引起肠道壁穿孔，导致幼虫死亡。
注： Cef， Carb 抑菌类抗生素
（1）抗虫植物的抗虫效果与Bt蛋白的表达量直接相关，用________________ 作为抗原，通过制备________________ 作为特异探针，对Bt蛋白表达进行检测。将Bt蛋白基因导入植物细胞的方法有________________ 和________________ 等。
（2）在农杆菌转化过程中，防止农杆菌过度生长是转基因成败的重要环节。因此植物材料和农杆菌共同培养结束后，转化组织需要________________ 处理，据图分析，选择抗生素的________________ 很关键。光电比色法可用于细菌细胞密度的吸光值的测定，OD600指的是某种溶液在600nm波长处的吸光值。吸光值与溶液中吸光物质的浓度呈正比，通常用于细菌细胞密度（OD600）测量；在测量过程中要保持溶液中的细菌处于____状态。 如图可知，________________ （填Cef或Carb）在低浓度条件下对农杆菌有更好的抑制效果。
II．回答与泡菜制作有关的问题：
（1）泡菜发酵过程中的主要菌种是________________， 在________________ 条件下，微生物将蔬菜中的糖和其他营养物质发酵成有机酸、________________ 和________________ 等。
（2）在泡菜制作过程中________________ ，________________ 两部操作主要是为了减少杂菌，还可以采用________________ ，________________ 两种方法缩短腌制时间。
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【题目】图甲中电表Ⅰ两端连在神经纤维同一点膜的内外两侧，电表Ⅱ两端均连在 膜外，图乙、图丙为电位变化示意图。下列分析正确的是（ ）
A.当兴奋从p 点传至R点的过程中，膜外电流方向与兴奋的传导方向相同
B.电表Ⅰ记录到①→②过程时，Q处膜内Na+的浓度逐渐升高
C.图乙中②→③电位变化对应于图甲中Q→R兴奋传导过程
D.在P点给予适当刺激后，电表Ⅱ电位变化波形与图丙基本相同
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【题目】如图为中心法则图解。下列有关叙述，错误的是（ ）
A.过程a会发生在有丝分裂间期和减数第一次分裂前的间期
B.人体浆细胞中只能发生过程b和c
C.过程a、b、c、d、e都能发生碱基互补配对
D.过程d只能发生在逆转录病毒中
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【题目】糖尿病是一种常见的疾病，可以分为I型糖尿病和Ⅱ型糖尿病，I型糖尿病是由于自身免疫系统破坏胰岛B细胞引起的，也称为胰岛素依赖型糖尿病；Ⅱ型糖尿病是由于胰岛素不能有效发挥作用引起的，也称非胰岛素依赖型糖尿病。部分糖尿病是由于患者体内的抗体1和抗体2分泌异常引起，其机理如图所示：
（1）人体血糖平衡的调节方式为______________，胰岛素的作用是_____________________。
（2）上图由于抗体2分泌异常造成的糖尿病属于____________________型糖尿病，这类病人体内的胰岛素含量往往_________________（填“高于”或“低于”）健康人。
（3）患者胰岛素分泌不足，血糖浓度维持较高水平。糖尿病人形成原尿后，高浓度的葡萄糖不能被完全重吸收，从而影响到______________，导致糖尿病人的尿量增多。请据所学知识推测，大多数糖尿病人在患病初期，抗利尿激素的分泌量与正常人相比会_________，原因是________________________。
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【题目】图表示豌豆叶肉细胞中，甲、乙两种细胞器相关生理活动，下列相关叙述符合事实的是（ ）
A.O2产生于甲细胞器的内膜，在乙细胞器的内膜被利用
B.甲细胞器中将光能转变为化学能的色素位于类囊体薄膜
C.CO2可产生于乙细胞器的基质，在甲细胞器基质被利用
D.乙中ATP主要在其内膜上生成
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【题目】下图 1 表示某绿色植物叶肉细胞中进行的两个相关的生理过程，其中 a～f 表示物质，甲和乙表示两种细胞器；图 2 表示在不同条件下测定该植物叶片质量变化情况(均考虑为有机物的重量变化)。请据图分析回答：
（1）甲是光合作用的场所，光合作用的过程可用反应式概括为：_______________。甲中色素吸收的光能有两方面用途：①_______________、②_______________。
（2）甲和乙内部增加膜面积的方式分别是：甲_______________、乙_______________。
（3）物质 e 被彻底分解的场所是乙中的_______________。
（4）图 2 中，影响 A、B 两点光合速率的主要因素都是_______________。
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