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    4．磷是植物生长的重要营养元素之一，为了从土壤中筛选出能够将难溶性磷酸盐转化为植物能吸收的可溶性磷的优良解磷菌株，以便将其添加到有机肥中，改善植物磷元素供应．科研人员进行如下实验：
    实验原理：固体培养基中难溶性磷酸盐在微生物作用下溶解，会在菌落周围形成透明圈，透明圈直径（D）与菌落直径（d）的比值（D/d）代表微生物溶解磷的能力大小．
    实验步骤：步骤1 取某地区土样5g制得土壤溶液后稀释，取稀释液1mL接种到基础培养基A上，在适宜温度下培养72h．步骤2在基础培养基A上用接种环挑取代表性菌落再次接种，培养3～4d后观察菌落特征和透明圈的大小，初步筛选出三种优良解磷菌株（如表）．
    菌株透明圈直径
    （D）单位：mm    		菌落直径
    （d）单位：mm    		D/d
    甲22.815.31.5
    乙20.77.72.7
    丙8.27.51.1
    请分析回答下列问题：
    （1）为了筛选出所需菌株，培养基中唯一的磷源应该是难溶性磷酸盐，步骤1中接种方法是稀释涂布平板法，步骤2中接种环的灭菌方法是灼烧灭菌．
    （2）土壤中的磷以PO43-（HPO42-或H2PO4-）形式被植物细胞吸收，吸收后可用于合成核酸、磷脂、ATP、NADPH等．（填出2种含磷的有机物）．
    （3）根据实验结果可以确定溶解磷能力最强的菌株是乙．为了保持所得菌种的纯净，需要进行菌种的保藏．临时保藏时，要将菌种接种到试管的固体斜面培养基上，长成菌落后放入4℃的冰箱中；长期保存时可以采用甘油管藏的方法．
    （4）实验中所用的固体培养基往往是在液体培养基中加入凝固剂琼脂制备的，培养基上出现的单一菌落可以看做一个种群（填“种群”、“群落”、“生态系统”）．

    分析 分析题图和表格：“透明圈直径（D）与菌落直径（d）的比值（$\frac{D}{d}$）代表微生物溶解磷的能力大小”，结合表格可知，菌株乙的比值（$\frac{D}{d}$）最大，说明菌株乙的溶解磷的能力最大．

    解答 解：（1）为了筛选出所需菌株，培养基中唯一的磷源应该是难溶性磷酸盐，步骤1中“制得土壤溶液后稀释，取稀释液lmL接种到基础培养基A上”，由此可见接种方法是稀释涂布平板法，步骤2中接种环的灭菌方法是灼烧灭菌．
    （2）土壤中的磷以离子形式被植物细胞吸收，磷离子的存在形式有PO43-（HPO42-或H2PO4-），吸收后可用于合成核酸、磷脂、ATP、NADPH等含磷的有机物．
    （3）“透明圈直径（D）与菌落直径（d）的比值（$\frac{D}{d}$）代表微生物溶解磷的能力大小”，结合表格可知，菌株乙的比值（$\frac{D}{d}$）最大，说明菌株乙的溶解磷的能力最大．为了保持所得菌种的纯净，需要进行菌种的保藏．临时保藏时，要将菌种接种到试管的固体斜面格养基上，长成菌落后放人4℃的冰箱中；长期保存时可以采用甘油管藏的方法．
    （4）固体培养基往往加人琼脂作为凝固剂．培养基上出现的单一菌落可以看做一个种群．
    故答案为：
    （1）难溶性磷酸盐     稀释涂布平板法      灼烧灭菌
    （2）PO43-（HPO42-或H2PO4-）      核酸、磷脂、ATP、NADPH等
    （3）乙     固体斜面     甘油管藏
    （4）琼脂     种群

    点评 本题结合实验表格结果考查了微生物培养和分离的有关知识，要求考生识记磷元素在土壤中的存在形式以及含磷的有机物，掌握微生物分离与纯化的方法，识记菌种的保藏的方法．

    练习册系列答案
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    A．B．C．D．

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    B．基因频率的定向改变是生物进化的实质
    C．同一物种的两个不同种群间的地理隔离不会阻碍其基因交流
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    （2）取自公鼠附睾中的精子只需放入获能培养液中培养一段时间后，就可进行体外受精，若是牛、羊等提供的精子，则需放入含一定浓度的肝素或钙离子载体的溶液中诱导其获能．
    （3）图中过程⑥称为胚胎移植，为使代孕母鼠与供体母鼠生殖器官的生理变化相同，此前需对代孕母鼠作同期发情处理．
    （4）采用胚胎分割移植的方法可获得较多基因组成相同的转基因小鼠，操作时需选择发育到桑椹胚或囊胚期的胚胎进行．若选用囊胚期的胚胎，操作过程需要特别注意的问题是对内细胞团均等分割．ES细胞是由囊胚或原始性腺中分离出的一类细胞，该类细胞在饲养层细胞上，或在添加抑制因子的培养液中，能够维持不分化的状态．

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    （3）发生急性低血糖时，对血糖浓度敏感的神经元可通过细胞a促进细胞c分泌相应信号激素来进行调节．在这个调节过程中，涉及的信号变化是下丘脑神经内分泌细胞的电信号转变为内分泌系统的激素信号．
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