Question

【题目】科研人员利用基因工程技术获得了耐储存的转基因番茄，其原理如下图所示：

请回答下列问题。

（1）培育该转基因番茄过程中，目的基因是___________，核心步骤是___________。若要迅速获得大量目的基因，常用的技术是____________。

（2）重组质粒导入番茄细胞时，可以先让番茄细胞经过脱分化得到愈伤组织，再把愈伤组织浸入到含有重组质粒的___________菌液中，通过该菌的___________作用使目的基因进入番茄细胞。这种方法往往需要将目的基因结合到___________上，并最终将目 的基因插入到番茄细胞的___________上。

（3）据图分析，乙烯合成酶的反义基因与乙烯合成酶基因的异同是___________。

Answer 1

【答案】乙烯合成酶的反义基因 基因表达载体的构建 PCR 农杆菌 转化 Ti质粒的了一DNA 染色体DNA 组成它们的碱基对排列顺序都相同，但转录的模板链不同

【解析】

基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。

（1）培育该转基因番茄过程中，目的基因是乙烯合成酶的反义基因，核心步骤是基因表达载体的构建。若要迅速获得大量目的基因，常用的技术是聚合酶链式反应（PCR）。
（2）重组质粒导入番茄细胞时，可以先让番茄细胞经过脱分化得到愈伤组织，再把愈伤组织浸入到含有重组质粒的农杆菌菌液中，通过该菌的转化作用使目的基因进入番茄细胞。这种方法往往需要将目的基因结合到Ti质粒的T-DNA上，并最终将目的基因插入到番茄细胞的染色体DNA。
（3）乙烯合成酶的反义基因与乙烯合成酶基因的异同是组成它们的碱基对的种类、数量和排列顺序都相同，但转录mRNA的模板链不同。