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    如图1所示，若用两种识别切割序列完全不同的限制酶E和F从基因组DNA上切下目的基因，并将之取代质粒pZHZ1（3.7kb，1kb=1000对碱基）上相应的E-F区域 （0.2kb），
    （1）那么所形成的重组质粒pZHZ2
     
    ．
    A．既能被E也能被F切开        B．能被E但不能被F切开
    C．既不能被E也不能被F切开    D．能被F但不能被E切开

    （2）已知在质粒pZHZl中，限制酶G切割位点距限制酶E切割位点0.8kb，限制酶H切割位点距限制酶F切割位点O．5kb．若分别用限制酶G和H酶切两份重组质粒pZHZ2样品，据上表所列酶切结果判断目的基因的大小为
     
    kb；并将目的基因内部的限制酶G和H切割位点标注在图2中．
    （3）若想在山羊的乳汁中收获上述目的基因的表达产物，则需将重组质粒pZHZ2导入至山羊的
     
    细胞中．若pZHZ2进入细胞后插入在一条染色体DNA上，那么获得转基因纯合子山羊的方式是
     
    ．
    （4）上述目的基因模板链中的．TGA序列对应一个密码子，翻译时识别该密码子的tRNA上相应的碱基序列是
     
    ．
    考点：基因工程的应用
    专题：
    分析：据图1分析，限制酶具有专一性，只能识别特定的DNA序列，并在特定的位点切割磷酸二酯键形成DNA片段，获取目的基因和质粒时切割位点是E和F，重组质粒上含有限制酶E和F的切割位点，所以既能被E也能被F切开．
    解答： 解：（1）用限制酶从基因组DNA上切下目的基因，并取代质粒pZHZ1（3.7kb，1kb=1000对碱基）上相应的E-F区域 （0.2kb），用DNA连接酶连接后形成重组质粒，则在重组质粒中仍然含有限制酶E和限制酶F的切割位点，形成的重组质粒pZHZ2既能被E也能被F切开，故A正确．
    （2）根据题中信息，原来质粒长度为3.7kb，切去EF（0.2kb）之后还有3.5kb，插入目的基因后形成重组质粒，重组质粒的长度为1.6+3.1=1.2+3.5=4.7kb，进而可推导出目的基因长度为4.7-3.5=1.2kb．重组质粒中G的切割位点距E的切割位点0.8kb，单独用限制酶G切割后产生1.6kb和3.1kb两种片段，说明在重组质粒中除了图中标示出来的G酶切位点外，还有一个G酶切位点；H的酶切位点距F0.5kb，用H单独酶切后产生1.2kb和3.5kb两种片段，说明在重组质粒中除了图中标示出来的H酶切位点外，还有一个H酶切位点；根据题中信息提示“将目的基因内部的限制酶G和H切割位点标注在图中”，可确定在EF之间分别含有一个G和H的酶切位点，进而可断定G的识别位点，在距E点右侧0.8kb处，H的识别位点在距F左侧0.7kb处．
    （3）将目的基因导入动物细胞中，通常以受精卵作为受体细胞，当受精卵发育成山羊后，在雌性山羊的乳汁中可以提取到目的基因的表达产物．重组质粒插入在一条染色体DNA上，可通过雌雄转基因山羊杂交的方法来获取转基因纯合子山羊．
    （4）根据碱基互补配对原则，目的基因的模板链中碱基为TGA，则mRNA中对应的密码子为ACU，tRNA中的反密码子为UGA．
    故答案为：
    （1）A
    （2）1.2    

    （3）受精卵  转基因山羊间相互交配    
    （4）UGA
    点评：本题综合考查基因工程的相关内容，涉及到基因工程常用工具酶的切割位点的确定、根据限制酶切割结果推断目的基因的长度、基因工程中常用的受体细胞、密码子反密码子的推导等问题，综合性强，有一定难度．
    练习册系列答案
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    科目：高中生物 来源： 题型：

    玉米体细胞中有20条染色体，在细胞有丝分裂后期，细胞中的染色体、DNA分子数目依次为（　　）
    A、20、20
    B、20、40
    C、40、20
    D、40、40

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    科目：高中生物 来源： 题型：

    下列有关细胞成分和基本结构的说法中，正确的是（　　）
    A、原核细胞中的RNA可作为遗传物质直接为合成蛋白质提供模板
    B、氨基酸、葡萄糖和核苷酸分子均可自由通过核孔
    C、变形虫对食物的摄取与体内线粒体有关
    D、水浴加热煮沸时，DNA中的氢键和蛋白质中的肽键都会断裂，导致分子的空间结构改变

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    科目：高中生物 来源： 题型：

    1990年，在经过了长期的审查后，美国NIH（美国国立卫生研究所）终于批准了对一名患有严重复合型免疫缺陷症的4岁女孩实施基因治疗．腺苷酸脱氨酶是免疫系统完成正常功能必需的酶，临床患者先天腺苷酸脱氨酶（ada）基因缺乏，导致她患重症联合免疫缺陷病（SCID）．因此，她不能抵抗任何微生物的感染，只能在无菌条件下生活．运用现代生物技术进行治疗后，患者的免疫功能得到了很大的修复．如图表示治疗SCID的过程，请据图回答下列问题

    （1）在这个实例中充当“分子运输车”的是
     
    ，目的基因是
     
    ，目的基因的受体细胞是
     
    ．
    （2）要获得携带人正常ada基因的细菌，需要的工具包括
     
    、
     
    、
     

    （3）人的ada基因与胰岛素基因相比，其主要差别是
     
    ．
    （4）如果科学家通过基因工程技术，成功改造了某女性血友病患者的造血干细胞，使其凝血功能全部恢复正常．写出该女性的卵原细胞在治疗前后的基因型：（正常基因为H，血友病基因为h）
     
    、
     
    ．
    （5）如果该女性在恢复正常后，与一正常男性结婚，所生子女的表现型为
     
     （在下列选项中选择正确的一项），并说明理由：
     
    ．
    A．子、女儿全部正常              B．儿子、女儿中各一半正常
    C．儿子全部患病、女儿全部正常    D．儿子全部正常、女儿全部患病．

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    科目：高中生物 来源： 题型：

    如图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线．图中tetR表示四环素抗性基因，ampR表示氨苄青霉素抗性基因，BamH I、Hind III、Sma I直线所示为三种限制酶的酶切位点．据图回答：

    （1）构建基因表达载体时，可用一种或多种限制酶进行切割．为了避免目的基因和载体在酶切后产生的末端发生任意连接，图中将人乳铁蛋白基因插入载体应选用
     
    限制酶同时酶切载体和人乳铁蛋白基因．筛选含有重组载体的大肠杆菌首先需要在含
     
    的培养基上进行．（2）能使人乳铁蛋白基因在乳腺细胞中特异性表达的调控序列是
     
    （填字母代号）．
    A．启动子     B．tetR     C．复制原点    D．ampR
    （3）过程①可采用的操作方法是
     
    （填字母代号）．
    A．农杆菌转化    B．大肠杆菌转化    C．显微注射    D．细胞融合
    （4）对早期胚胎进行切割，经过程②可获得多个新个体．这利用了细胞的
     
    性．
    （5）为检测人乳铁蛋白是否成功表达，可采用
     
    （填字母代号）技术．
    A．核酸分子杂交     B．基因序列分析     C．抗原-抗体杂交     D．PCR．

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    科目：高中生物 来源： 题型：

    大肠杆菌pUC118质粒的某限制酶唯一酶切序列，位于该质粒的lacZ基因中，lacZ基因中如果没有插入外源基因，lacZ基因便可表达出β-半乳糖苷酶，当培养基中含有IPTG和X-gal时，X-gal便会被β-半乳糖苷酶水解成蓝色，大肠杆菌将形成蓝色菌落；如果lacZ基因中插入了外源基因，带有pUC118质粒的大肠杆菌便不能表达β-半乳糖苷酶，培养基中的X-gal不会被水解成蓝色，大肠杆菌将形成白色菌落．pUC118还携带了氨苄青霉素抗性基因．如图是利用lacZ基因的插入失活筛选重组质粒示意图．据图回答下列问题：

    （1）作为受体大肠杆菌应
     
    ，以方便筛选已导入重组质粒的受体大肠杆菌．取用氯化钙溶液处理（目的是 ）
     
    过的受体大肠杆菌，置于试管Ⅱ中，并加入
     
    ．
    （2）图中的培养基中除含有大肠杆菌必需的葡萄糖、氮源、无机盐、水、生长因子等营养物质外，还应加入
     
    等物质，用以筛选导入了重组质粒的受体大肠杆菌．
    （3）将上述处理后的大肠杆菌置于图中选择培养基上培养，以检测受体大肠杆菌是否导入重组质粒，请预测菌落的颜色，并分析结果：①
     
    ．②
     
    ．

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    科目：高中生物 来源： 题型：

    存在于RNA中而不存在于DNA，存在于叶绿体而不存在于线粒体，存在于动物细胞质而不存在于植物细胞质中的糖类物质分别是（　　）
    A、核糖、葡萄糖、糖原
    B、脱氧核糖、核糖、纤维素
    C、核糖、脱氧核糖、麦芽糖
    D、脱氧核糖、葡萄糖、淀粉

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    科目：高中生物 来源： 题型：

    采用基因工程的方法培养抗虫棉，下列导入目的基因的作法正确的是（　　）
    ①将毒素蛋白注射到棉受精卵中
    ②将编码毒素蛋白的DNA序列注射到棉受精卵中
    ③将编码毒素蛋白的DNA序列与质粒重组导入土壤农杆菌细胞中，用该细菌感染棉花体细胞，再进行组织培养
    ④将编码毒素蛋白的DNA序列与质粒重组，借助花粉管进入到棉花子房，并进入受精卵．
    A、①②B、②③C、③④D、④①

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    科目：高中生物 来源： 题型：

    如图为红绿色盲遗传系谱图，有关推测错误的是（　　）
    A、4是致病基因的携带者
    B、8与10的基因型不可能相同
    C、3和4如有更多子女，则男孩也可能患色盲，女孩也可能色觉正常
    D、5和11结婚所生的女孩色觉皆正常，男孩色觉正常、色盲的机率各占一半

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