Question

14．请回答下列有关生物技术实践方面的问题：
（1）微生物的培养和鉴别技术是一项基本技术．为了从样本中获取细菌的单菌落，可用平板划线法及稀释涂布法将样本接种于固体培养基表面，经过选择培养、鉴別等步骤获得．培养基进行灭菌时，应该采用的方法是髙压蒸汽灭菌法．为统计样品中活菌的数目，在37℃培养箱中培养适当时间后形成菌落，一般选择菌落数在30-300的平板进行计数．
（2）泡菜虽然好吃，但其中的亚硝酸盐会危害人体健康．亚硝酸盐在特定条件下会转变成亚硝胺，这是一种致癌物，测定亚硝酸盐含量的原理是在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与显色剂反应，生成玫瑰红色物质正常情况下，随着腌制时间的延长，亚硝酸盐含量的变化趋势是先增加后减少，然后基本不变．

Answer 1

分析 1、微生物常见的接种的方法
①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养．在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落．
②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落．
2、泡菜的制作原理
泡菜的制作离不开乳酸菌．在无氧条件下，乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸．
3、测定亚硝酸盐含量的原理
在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N1萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料．将显色反应后的样品与已知浓度的标准液进行目测对比，可以大致估算出亚硝酸盐的含量．

解答 解：（1）为了从样本中获取细菌的单菌落，可用平板划线法及稀释涂布法将样本接种于固体培养基表面，经过选择培养、鉴別等步骤获得．培养基进行灭菌时，应该采用的方法是髙压蒸汽灭菌法．为统计样品中活菌的数目，在37℃培养箱中培养适当时间后形成菌落，一般选择菌落数在30-300的平板进行计数．
（2）亚硝酸盐在特定条件下会转变成亚硝胺，这是一种致癌物，测定亚硝酸盐含量的原理是在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与显色剂反应，生成玫瑰红色物质．发酵初期，由于硝酸盐还原菌的活动，亚硝酸盐含量有所增加；发酵中期，由于硝酸盐还原菌受抑制，同时形成的亚硝酸盐又被分解，因而亚硝酸盐含量下降．所以在整个发酵过程中，亚硝酸盐含量的变化趋势是先增加后减少，然后基本不变．
故答案为：
（1）平板划线      稀释涂布     固体培养基    髙压蒸汽灭菌法     30-300
（2）亚硝胺    盐酸酸化      先增加后减少，然后基本不变

点评 本题考查了微生物的分离与培养以及泡菜制作的有关知识，要求考查能够掌握微生物分离与纯化以及灭菌的方法，识记泡菜制作的原理以及制作过程中亚硝酸盐含量的变化趋势，难度适中．