Question

12．图是基因工程中利用pBR322质粒（Ampr表示氨苄青霉素抗性基因，Tetr表示四环素抗性基因）与抗病基因构建重组质粒的示意图，该质粒上的PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ等四种限制性核酸内切酶的识别序列及切割位点见下表．结合图表分析，下列叙述错误的是（　　）

限制性核酸内切酶	ApaⅠ	EcoRⅠ	PstⅠ	Smal
识别序列和切割位点	↓ AGCT TCGA ↑	↓ GAATTC CTTAAG ↑	↓ CTGCAG GACGTC ↑	↓ CCCGGG GGGCCC ↑

• A． pBR322质粒、抗病基因和重组质粒的基本组成单位都是脱氧核苷酸
• B． 形成重组质粒时，应选用限制性核酸内切酶PstⅠ和EcoRⅠ对含抗病基因的DNA、质粒进行切割
• C． 一个质粒被限制性核酸内切酶EcoRⅠ、PstⅠ、SmaⅠ同时切割后可得到3个DNA片段和6个黏性末端
• D． 将受体细胞置于含有四环素的培养基上培养，可筛选出已导入抗病基因的受体细胞

Answer 1

分析 分析题图：质粒和外源DNA分子都含有三种限制酶切点，即限制酶EcoRⅠ、PstⅠ、SmaⅠ，其中Sma I切割位点在目的基因上，所以不能用该酶切割外源DNA了．用PstⅠ和EcoRⅠ酶切质粒切成两个片段，用PstⅠ和EcoRⅠ能将外源DNA切成三段，只有含目的基因的片段通过DNA连接酶与质粒连接形成的重组质粒符合要求，而另一个重组质粒无目的基因，不符合要求．导入目的基因的受体细胞，其重组质粒是用PstⅠ和EcoRⅠ酶切割的，其中的Amp^r（氨苄青霉素抗性基因）已被破坏，不能抗氨苄青霉素．

解答 解：A、pBR322质粒、抗病基因和重组质粒的化学本质都是DNA，所以它们的基本组成单位都是脱氧核苷酸，A正确；
B、形成重组质粒时，需要用同种限制酶切割目的基因和质粒，图中看到目的基因上含有三种限制酶切割位点，但是Sma I酶的切割位点存在于目的基因中间，因此应选用PstⅠ和EcoRⅠ两种限制酶，对含抗病基因的DNA和质粒进行切割，B正确；
C、一个质粒被限制性核酸内切酶EcoRⅠ、PstⅠ、SmaⅠ同时切割后可得到3个DNA片段和6个平末端，C错误；
D、导入目的基因的受体细胞，其重组质粒是用PstⅠ和EcoRⅠ酶切割的，其中的Amp^r（氨苄青霉素抗性基因）已被破坏，不能抗氨苄青霉素，所以将受体细胞置于含有四环素的培养基上培养，可筛选出已导入抗病基因的受体细胞，D正确．
故选：C．

点评 本题考查基因工程的操作等知识点，意在考查学生的识图和理解能力，属于中档题，解题的关键是理解标记基因结构完整，则能在对应培养基中生长．