Question

16．如图是利用基因工程技术生产人胰岛素的操作过程示意图，请据图回答：
（1）能否利用人的皮肤细胞来完成①过程？不能．为什么？皮肤细胞中的胰岛素基因未表达，不能形成胰岛素mRNA．
（2）过程②③必需的酶分别是逆转录酶、解旋酶．
（3）在利用A、B获得C的过程中，必须用同一种限制性内切酶切割A和B，使它们产生相同的黏性末端，再加入DNA连接酶，才可形成C．
（4）为使过程⑧更易进行，可用CaCl₂（药剂）处理D等．
（5）图中的B起到运载体的作用，它应该符合的条件是能在宿主细胞中正常生存并复制，具有标记基因，具有多个限制酶的切点，能起到这种作用的有质粒、噬菌体、动植物病毒等．图中的D是基因工程中的受体细胞，能作这种细胞的有大肠杆菌、土壤农杆菌、酵母菌、动植物细胞等．

Answer 1

分析 根据题意和图示分析可知：图示是利用基因工程技术生产胰岛素的操作过程示意图．图中①表示从胰岛B细胞中获取胰岛素mRNA的过程；②为逆转录过程，A为胰岛素基因；③④⑤表示目的基因的扩增过程；⑥表示用限制酶切割运载体形成黏性末端的过程；⑦表示基因表达载体的构建过程；⑧表示将目的基因导入受体细胞的过程；⑨表示目的基因随着受体细胞的增殖和扩增；⑩是从培养液中获取胰岛素的过程．

解答 解：（1）由于分化的细胞中基因选择性表达，皮肤细胞中的胰岛素基因不表达，无胰岛素mRNA，所以不能利用人的皮肤细胞来完成①过程．
（2）过程②表示的为逆转录过程，遗传信息传递为mRNA→DNA，因此需要的酶为逆转录酶．过程③由双链DNA形成单链DNA的过程，需要解旋酶和ATP．
（3）在利用A、B获得C的过程中，必须用同一种限制性内切酶切割A和B，使它们产生相同的黏性末端，再加入DNA连接酶，才可形成C重组质粒．
（4）⑧是将目的基因导入受体细胞的过程，当受体细胞是微生物细胞时，常采用感受态细胞法，即用CaCl₂处理微生物细胞使其成为易于吸收周围环境中DNA分子的感受态细胞，从而将目的基因导入受体细胞．
（5）图中的B起到运载体的作用，它应该符合能在宿主细胞中正常生存并复制，具有标记基因，具有多个限制酶的切点等条件，能起到这种作用的有质粒、噬菌体、动植物病毒等．图中的D是基因工程中的受体细胞，能作这种细胞的有大肠杆菌、土壤农杆菌、酵母菌、动植物细胞等．
故答案为：
（1）不能　皮肤细胞中的胰岛素基因未表达，不能形成胰岛素mRNA
（2）逆转录酶　解旋酶
（3）同一种限制性内切酶　黏性末端　DNA连接酶
（4）CaCl₂
（5）能在宿主细胞中正常生存并复制，具有标记基因，具有多个限制酶的切点　质粒、噬菌体、动植物病毒 　受体　大肠杆菌、土壤农杆菌、酵母菌、动植物细胞

点评 本题结合利用基因工程技术生产胰岛素的操作过程示意图，考查基因工程、细胞分化等知识，要求考生识记基因工程的工具及操作步骤，能准确判断图中各过程或物质的名称；识记细胞分化的概念，掌握细胞分化的实质，能结合所学的知识准确答题．