Question

17．高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性．研究者从热泉中筛选了高效产生高温淀粉酶的嗜热菌，其筛选过程如图甲所示，请据图回答有关问题：

（1）过程①②合称为稀释涂布平板法．按功能分，Ⅰ号培养基称为选择培养基；该培养基中必须以淀粉作为唯一碳源．Ⅱ号培养基的接种方法为平板划线法．
（2）对配制的培养基采用高压蒸汽灭菌，目的是防止杂菌污染．
（3）在1号培养基上挑出能产生淀粉酶的嗜热菌菌落的鉴别方法是培养基上会出现以该菌的菌落为中心的透明圈；也可将得到的菌悬液转接于同时含有葡萄糖和淀粉作碳源的固体培养基上培养，得到若干菌落后用碘液作显色处理，看到如图乙所示情况，可判断图中无蓝色透明圈的菌落含有所需菌种．
（4）如果高温淀粉酶的产业化需要其活性在固定化处理时不受损失，且在多次重复使用后仍能维持稳定的酶活性，则应选择图丙中的AB（填写字母）固定化工艺．

Answer 1

分析 接种微生物的方法主要是稀释涂布平板法和平板划线法；稀释涂布线法：逐步稀释菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养；平板划线法由接种环以菌操作沾取少许待分离的材料，在无菌平板表面进行平行划线、扇形划线或其他形式的连续划线，微生物细胞数量将随着划线次数的增加而减少，并逐步分散开来，如果划线适宜的话，微生物能一一分散，经培养后，可在平板表面得到单菌落．
高压蒸汽灭菌锅是灭菌的一个设备，一般压力在100KPa，温度在121℃的条件下，维持15-30分钟用于培养基的灭菌；用酒精擦拭双手是消毒的一种方法；火焰灼烧可以迅速彻底地灭菌，适用于微生物的接种工具，如接种环、接种针等．

解答 解：（1）据图分析，从液体菌种到固体平板的过程及结论生长均匀分析，过程①②为稀释涂布平板法．按功能分，Ⅰ号培养基为选择培养基，需要使用以淀粉为唯一的碳源．Ⅱ号培养基的接种方法是平板划线法．
（2）培养基的高压蒸汽灭菌的目的是防止杂菌污染．
（3）根据题意可知，Ⅰ号培养基上会出现以该菌的菌落为中心的透明圈可以鉴别嗜热菌菌落．淀粉与碘液反应呈蓝色，但如果淀粉分解菌中的淀粉酶将淀粉水解后就不能呈蓝色，则会出现无色的透明圈，故图乙所示情况中无蓝色透明圈的菌落含有所需菌种．
（4）据图分析，A是物理吸附法，B是化学结合法，C是包埋法．由于酶容易从包埋材料中漏出，所以一般不使用包埋法，但可以使用物理吸附法或化学结合法．故选：AB．
故答案为：
（1）稀释涂布平板法    选择培养基   淀粉    平板划线法
（2）防止杂菌污染
（3）透明圈    无蓝色透明圈
（4）AB

点评 本题考查微生物选择、培养、利用等相关知识，意在考查学生从材料中获取相关的生物学信息，并能运用这些信息，结合所学知识解决相关的生物学问题．